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相关内容： 细胞周期的概念及其时间的计算方法。
题 目： 4、简述单克隆抗体的制备过程。
考查点 ： 细胞工程。
参考答案： 产生杂交瘤细胞系的过程大致为：
先给小鼠接种一个抗原，并在几个星期内连续接种几次，但几次免疫的时间间隔不能太短，以防动物死亡，后检测小鼠体内是否引起了免疫反应。若起了免疫反应，就把小鼠杀死，取出脾脏洗净磨细，制成B细胞悬浮液。将制成的B细胞悬浮液与骨髓瘤细胞悬浮液混合，由于免疫动物品系与所采用的骨髓瘤细胞在品系上差距较大，所产生的杂交瘤细胞系稳定性差。因此，在制备单克隆抗体时，一般采用与骨髓瘤细胞系来源相同的同一品系动物免疫，由于骨髓瘤细胞系多来自于Balb/c小鼠，所以免疫动物时也采用这一品系的小鼠。细胞融合可以采用仙台病毒介导。也可以用PEG介导。骨髓瘤细胞是次黄嘌呤-鸟嘌呤核糖转移酶缺陷型的（HGPRT-）。二者混合后的细胞悬浮液与35%的PEG或仙台病毒混合几分钟后，再转移至一含次黄嘌呤氨基蝶呤和胸腺嘧啶（HAT）培养基中。
由于使用HAT培养基，未融合的脾细胞、脾-脾融合的细胞不能生长。HGPRT-的骨髓瘤细胞和瘤-瘤融合的细胞不能利用次黄嘌呤作为前体合成鸟嘌呤、腺嘌呤，从而影响了核苷酸的合成，但可以利用脱氢叶酸还原酶合成嘌呤，所以加入氨基蝶呤。因此他们均不能合成嘌呤，不能生长。
这样一来就只有脾-瘤融合的细胞可以在HAT培养基上生长，虽然通过脱氢叶酸还原酶合成嘌呤的途径被加入氨基蝶呤阻断了，脾细胞可以提供有功能的HGPRT，可以加入外源次黄嘌呤；同时骨髓瘤细胞提供了很强的细胞分裂功能。加入的胸腺嘧啶可以克服由于氨基蝶呤抑制脱氢叶酸还原酶而阻碍了嘧啶合成。10-14天后，HAT培养基就只有脾-骨髓瘤细胞还能存活生长。由此可以转移到塑料多孔培养板上，在没有HAT的培养液中培养生长。
由于大量的非融合细胞死亡，少数或单个分散的细胞很难存活，所以培养时通常加入饲养细胞如小鼠腹腔巨噬细胞、小鼠脾细胞、大鼠胸腺细胞。
小鼠浆细胞（自变或诱变） 小鼠脾细胞（SRBC免疫，注射X蛋白）
不能在HAT培养基上生长的骨髓瘤细胞 PEG或仙台病毒 B细胞（●带有X抗体）
转移到HAT培养基
变非目标细胞大量死亡
多孔塑料板内培养单个细胞
2周 亲代细胞死亡
杂种细胞生长 接种动物生产
检测 冷冻保存
优质高产细胞 细胞培养生产
题 目： 5、什么是细胞表面粘着物质，它有那些功能？
考查点 ： 细胞的连接分子
参考答案： 同种类型细胞间的彼此粘连是许多组织的基本特征。他们是由特定的粘连分子介导的。这些粘连分子分为两类：一类需要钙离子的参与，另一类则不需要。许多细胞同时具有两类粘连分子。
钙粘连蛋白，是一种钙依赖的细胞-细胞粘连糖蛋白，对组织分化、结构维持有重要作用，分为E-钙粘连蛋白、P-钙粘连蛋白、N-钙粘连蛋白三类。E-钙粘连蛋白是上皮细胞主要的粘连分子。
N-CAM是脊椎动物中主要的不依赖于钙离子的细胞粘连分子。它促进同种类型细胞间连接。N-CAM由同一基因编码，各种N-CAM的不同主要是RNA拼接和蛋白糖基化的不同。
试 题 篇
细 胞 生 物 学
(二) 考研试卷
中国科学院1994年硕士生入学试题（A卷）
一、 是非题。（每题1分，共20分。答是写“+”， 答非写“—”。）
1、细胞分裂后就暂不发生生化代谢变化，休止在G1期。 （ ）
2、一切细胞都有细胞膜、细胞质和细胞核。 （ ）
3、细胞癌变可以视为细胞的异常分化。 （ ）
4、细胞生长因子的跨膜信号转导都是通过活化酪氨酸激酶实现的。 （ ）
5、干细胞和功能细胞在不断生长和分化的过程中都回表现出衰老的征象。 （ ）
6、核膜是在有丝分裂的前期破裂，末期重新建立。 （ ）
7、甾体激素受体，也有分布在细胞的质膜上。 &nb
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