p; 乳糖进入细胞后,由β-半乳糖苷酶催化变为诱导物别乳糖(allolactose)。
▓☉ 阻遏蛋白结合位点的DNA序列的对称性与阻遏蛋白四聚体的对称性是相应的,以+11为对称轴,每边各6bp的对称序列。
▓☉ 阻遏蛋白与Lac O的结合而提高了少数嘌呤碱基对甲基化的敏感程度。由于在DNA-阻遏蛋白的复合物中形成了一个憎水的口袋,从而加强了甲基化作用。
▓☉ 用胰蛋白酶在阻遏蛋白59-60位切断得抗胰蛋白酶核心和长头片段,N-端51肽片段称短头片段,有与操作子结合的能力。
▓☉ 阻遏蛋白四聚体结合于操作子时,诱导物是能与之结合的,诱导物结合位点位于核心片段上。
▓☉ 任何使阻遏蛋白与操作子结合的特异性下降20-30倍的变异,都使Lac酶系统的合成变为组成型。
▓☉ Lac操作元的突变体中,i-、is 位于核心片段,而it、i-d位于头部片段,其中,is 、it为不可诱导的显性突变。
▓☉ cAMP-CAP不仅调控乳糖、半乳糖、阿拉伯糖等糖类代谢有关的酶,而且三羧酸循环和呼吸链酶系统中的大多数酶,分解各种碳源底物的酶,降解某些氨基酸的酶、乙醛酸途径的酶等均表现为对葡萄糖效应敏感。
▓☉ 细胞代谢半乳糖需三中酶:半乳糖激酶、半乳糖转移酶、半乳糖表异构酶。
▓☉ 由一个调节基因控制的几个操纵元称调控元(regulon)。
▓☉ AraC蛋白有两种形式。没有阿拉伯糖存在时,表现为对AraBAD和AraC有阻遏作用,这种形式称为Crep。有阿拉伯糖存在时,表现为对AraBAD和AraC的诱导作用,这种形式称为Cind。
▓☉ 有葡萄糖存在时,即没有cAMP-CAP时,AraC也能以很低的本底水平表达很快会被Crep所阻遏,这种作用叫自身调控。
▓☉ 基因的表达按一定时间顺序而展现的,这种调控机制称时序调控,基因的时序调控大多是通过一种或几种蛋白因子与RNA聚合酶的相互作用来实现的。
▓☉ 在热震惊反应中大量表达的基因称热震惊基因。高盐环境、重金属离子、极度干燥等均能引起热震惊反应。广义上讲,它们均为应急反应(stress response)。由 δ32参与构成的RNA聚合酶全酶识别热震惊基因启动子。
▓☉ 从大肠杆菌到人类都具有热震惊基因。
▓☉ 热震惊反应不需要δ70,但它在热震惊基因中仍大量表达。
▓☉ ADPRT(ADP核糖基转移酶)可以将一个或两个ADP核糖基连接到RNA聚合酶α亚基的精氨酸胍基上,经修饰的α亚基使核心酶对寄主α亚基亲和力降低,而与T4基因所编码的蛋白Mot亲和力提高。
▓☉ 寄主拮抗溶源化的功能即hfl基因的表达受到cAMP的负调控。
▓☉ 从Pm起始转录的CImRNA没任何前导序列,缺少核糖体结合位点(S-D序列)。
▓☉ 溶原化过程是λ噬菌体的att位点与寄主的att位点进行位点特异性重组的过程。
▓☉ λ噬菌体的烈性突变是由操作子的突变引起的,只进行裂解生长。
▓☉ 阻遏或除阻遏的调控系统或多或少都带有全或无的性质。
▓☉ 衰减子系统的控制和阻遏蛋白的控制在方向上是相同的。
▓☉ 衰减子序列本身不能实现衰减作用,而必需通过对前导序列上14个氨基酸的前导序列翻译才能实现,因此衰减作用的实质是以翻译手段控制基因的转录。
▓☉ 在某些操纵元中,衰减子可以对不止一种氨基酸饥饿作出反应。
▓☉ 当前导肽翻译作用不存在时,mRNA必定在衰减子处终止。
▓☉ 负责合成嘧啶核苷酸的基因也有衰减子结构。
▓☉ 在色氨酸操纵元的衰减子结构中,先导肽的终止密码子位于终止子上游方向约45bp处,而在天冬氨酸转氨甲酰酶操纵元(pyrBI)中,先导肽的终止密码子位于终止子下游方向约25bp处;色氨酸操纵元中,是由于缺少色氨酸而使核糖体在连续的两个色氨酸密码子处停顿而影响了终止子结构的形成,其调控位点是两个连续的色氨酸密码子,而在pyrBI操纵元中,是由于缺少UTP使聚合酶在暂停位点发生停顿,使翻译核糖体裁追赶上RNA聚合酶。
▓☉ 反义RNA通过互补的碱基与特定的mRNA结合,结合位点通常是mRNA上的S-D序列、起始密码子AUG和部分N端的密码子,从而抑制mRNA的翻译,这类RNA称为干扰mRNA的互补RNA(micRNA),可用于研究基因的功能。
▓☉ 终止子结构的意义不仅仅在于转录的终止,还决定mRNA 的寿命。
▓☉ 由于sib位点位于整合酶基因的下游,而且整合酶mRNA的降解是从3’向着5’进行的,因此,sib位点对于整合酶基因表达的负调控又称返回调控(retroregulation)。
▓☉ 细菌中参与mRNA的降解的内切酶主要是RNaseⅢ。
▓☉ mRNA或经RNaseⅢ切断的mRNA片段都可以被3’ 外切核苷酸酶降解。
▓☉ 有的蛋白质能直接参与控制自身mRNA的翻译性。它的mRNA也有其结合位点。
▓☉ RF2对自身mRNA翻译的控制是利用它释放肽链的职能提前终止其mRNA的翻译。
▓☉ RF2的氨基酸密码子不处于同一阅读框中。
▓☉ EF-Tu的数目是核糖体瞩目的10倍,RNA聚合酶的每种亚基数目要比核糖体数目要少一些。
▓☉ 有独立S-D序列的基因,表达不受调节蛋白的控制。
▓☉ 细菌对不良营养条件产生的一系列反应叫严谨反应(stringent response),它调控了蛋白合成、基因转录、DNA复制等。反映触发器是位于核糖体A位上的无负载tRNA。
▓☉ 无负载tRNA进入A位后,无法形成新的肽键,GTP却在不断的消耗,形成空转反应(idling reaction)。
▓☉ 生成魔斑的反应需relA基因产物核糖体蛋白质L11及tRNA的TψC区。
▓☉ 碳源不足时,细胞内产生cAMP,氨基酸不足时,产生ppGpp、pppGpp。真核复制叉停顿时,产生ApppA,刺激真核DNA聚合酶α的活性以促进DNA的合成。
▓☉ 真核基因表达的研究手段有重组DNA技术、组织培养技术、定向诱变技术。
▓☉ RNA驱动的杂交用于非重复序列DNA,一般用回放实验来鉴定。
▓☉ Cot1/2为C/CO=1/2时的Cot的值,Cot1/2=1/K,K为复性二级反应常数。R ot1/2为某一cDNA组分半数分子与mRNA形成双链杂合体所需的R ot值。R ot为RNA浓度与反应时间的乘积。C ot为DNA浓度与反应时间的乘积。
▓☉ RNA饱和杂交试验中,是稀少mRNA驱动了DNA的杂交。
▓☉ 测定组织中mRNA的重复情况可用加性饱和杂交试验及组织过量mRNA与非重复DNA杂交。
▓☉ 凡能mRNA与杂交的DNA叫mDNA。
▓☉ 在个体发育过程中,表达的基因数目逐渐减少。
▓☉ 持家基因和奢侈基因在各种细胞类型中的功能表达范围及表达强度不同,细胞对它们的调控途径和机制也有不同。
▓☉ 引起同形异位现象的突变称同形异位突变(homeotic mutations)。
▓☉ 只引起触角末段部分转变为脚的相应末端部分,其余部分与触角相同,这种突变称芒脚突变。
▓☉ 果蝇中,有两个同形异位基因簇,一个叫ANT-C,包括Dfd、Scr、FtzAntp四个基因,另一个叫BX-C,包括Ubx、

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