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在线投稿 投稿指南 RSS订阅 资讯通告:2008年新版新飞越!
  • 2006-8-26十二种无血清培养基资料及目录介绍
  • 无血清培养基生产商:美国 Cambrex ㈠无血清培养基和试剂被广泛的应用于培养哺乳动物和无脊动物细胞以制备单克隆抗体,病毒抗原和重组蛋白等。大多数的无血清产品含有向细胞内转运离子的转铁蛋白和调节葡萄糖摄取量的胰岛素,以及一些蛋白[阅读全文]
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  • 2006-8-26常规培养基资料的详细介绍
  • 常规培养基生产商:美国 Cambrex Cambrex重点加强了液体培养基的生产和质量控制。其目标是为客户提供自始至终的高质量产品。 Cambrex出品的所有应用于体外诊断的产品均按优质生产规范(cGMP)生产。每一液体[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:佚名点击:501
  • 2006-4-26细胞株(系)
  • 一、概念     1、细胞系(Cell Line):原代培养舞经首次传代成功即成细胞系,由原先存在于原代培养物中的细胞世系(Lineage of Cells)所组成。   [阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:佚名点击:1625
  • 2006-3-26《医用细胞工程》教材部分章节word文件
  • 《医用细胞工程》教材部分章节word文件,点击下载 绪言第一篇 细胞工程的基本技术—细胞培养技术第1章 细胞培养的基本知识第2章 细胞培养的条件第3章 细胞培养的必备设施、常用器材和培养基第4章 原代细胞培养与建系第5章 正常细胞的培养技术[阅读全文]
  • 来源:suda.edu.cn作者:佚名点击:2333
  • 2006-3-16神经元的培养及转染
  • ProtocolsNeuron Culture Solutions  |  Neuron Culturing  |  Transfecting Neurons with Lipofectamine 2[阅读全文]
  • 来源:ehlerslab作者:ehlerslab点击:1111
  • 2006-2-23如何选择凝胶
  • 生物分子下游纯化的对象一般包括蛋白、酶、重组蛋白、单抗、抗体及抗原、肽类、病毒、核酸等。纯化前首先需要测定生物分子的各物理和化学特性,然后通过实验选择出最有效的纯化流程。       1.测[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:佚名点击:2020
  • 2006-1-11包涵体的纯化和复性总结
  • 一、菌体的裂解 1、怎样裂解细菌?  细胞的破碎方法  1.高速组织捣碎:将材料配成稀糊状液,放置于筒内约1/3体积,盖紧筒盖,将调速器先拨至最慢处,开动开关后,逐步加速至所需速度。此法适用于动物内脏组织、植物肉质种子等[阅读全文]
  • 来源:Internet作者:佚名点击:5873
  • 2005-10-17星型胶质细胞的纯化培养方法
  • 提供一种星型胶质细胞的纯化培养方法:1.  分离大鼠胚胎(16-18周)新皮层,置于L-15(或Hank’s平衡盐/DMEM溶液,无Hepes)培养基中,除去脑膜和血管、海马、尾核和其他非皮层组织。2.  用解剖刀将其切[阅读全文]
  • 来源:DXY.cn作者:佚名点击:1082
  • 2005-10-12免疫组化染色过程中存在的问题、原因分析及对策
  • 良好的免疫组化染色切片是正确判断染色结果的基础和前提。由于免疫组化染色过程中存在很多步骤或环节,每一个步骤或环节都可能影响到染色的最终结果,因此,要做好一张高质量的免疫组化切片并不是一件非常容易的事。需要病理技术员和病理医生密切配合、相互协[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:佚名点击:1056
  • 2005-9-23小鼠胚胎干细胞培养实验步骤
  • 以下是根据NIH老年病研究所提供的英文的R1胚胎干细胞培养protocol整理而成。根据经验作部分修改。1、一般培养-保持胚胎干细胞处于未分化状态培养基细胞复苏冻存细胞明胶包被细胞传代2 、体外分化培养基包被有多聚鸟氨酸/纤维结合蛋白的培养[阅读全文]
  • 来源:BIOON作者:吴生点击:1654
  • 2005-9-10小鼠心肌细胞原代培养
  • ㈠、概述    整体动物心肌细胞的增殖能力在出生后仅能维持一个短时期,小鼠在出生3周后DNA合成所需的酶的活性及心肌细胞的增殖能力就明显降低至成年鼠水平。小鼠心肌细胞的原代培养,一般选用生后1-10d的乳鼠心脏[阅读全文]
  • 来源:生物导航网作者:bioguider点击:1442
  • 2005-8-15电转化流程
  • 1.电转化感受态细胞的制备 1.      用枪头挑取单克隆菌落,投入盛有10ml LB液体培养基的50ml离心管中。(同时做培养基和枪头的空白对照) 2.   [阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:佚名点击:1832
  • 2005-6-22大肠杆菌感受态细胞的制备和转化
  • 大肠杆菌感受态细胞的制备和转化    第一节 概 述   在自然条件下,很多质粒都可通过细菌接合作用转移到新的宿主内,但在人工构建的质粒载体中,一般缺乏此种转移所必需的mob基因,因此不能自行完成从一[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:佚名点击:2340
  • 2005-6-22高效感受态细胞制作
  • 高效感受态细胞制作方法一A液:1M,MnCl2: B液:1M,HEPES,pH=6.2-6.8,用无菌水配,配后不需灭菌; C液 称取CaCl2 0.10g,KCl 1.18g,全部转入细口试剂瓶,然后加入46ml三蒸水,轻轻振荡使所有组分[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:佚名点击:2212
  • 2005-6-17细胞培养必备
  • 细胞培养方法 Invitrogen life technologies 细胞培养液 Invitrogen life technologies 培养液检索 ATCC 用的数千种不同培养液 参考表:特殊细胞需要的生长因子 Invitrogen [阅读全文]
  • 来源:免疫学信息网作者:佚名点击:1968
  • 2005-4-19胚胎干细胞电转染
  • ElectroSquarePorator™T820 ELECTROPORATION PROTOCOLMouse Embryonic Stem (ES Cells)Cell Preparation:Growth Medium: D[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:佚名点击:1221
  • 2005-4-5质粒提取
  • 质粒提取一、导论     已经提出过许多方法用于从细菌中提纯质粒DNA, 这些方法都含有以下3个步骤:细菌培养物的生长。细菌的收获和裂解质粒DNA的纯化。 (一)细菌培养物的生长   从琼脂平板上挑取一个单菌落[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:佚名点击:1970
  • 2005-4-5大肠杆菌质粒DNA的提取
  •  一、大肠杆菌质粒DNA的提取质粒DNA的提取是从事基因工程工作中的一项基本实验技术,但提取方法有很多种,以下介绍一种最常用的方法:碱裂解法:此方法适用于小量质粒DNA的提取,提取的质粒DNA可直接用于酶切、PCR扩增、银染序列分[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:佚名点击:3007
  • 2005-4-5石蜡包埋组织的DNA提取及其应用
  • 石蜡包埋组织的DNA提取及其应用近10年来,现代分子生物学技术越来越广泛地被用于人类疾病研究的诸领域,为了解病理状态下基因组DNA的变化积累了新资料。目前认为,人类基因组并非人们想像的那样稳定,诸如基因重排、扩增、缺失,突变和DNA甲基化类[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:佚名点击:2183
  • 2005-4-5哺乳动物细胞总RNA的分离
  • 哺乳动物细胞总RNA的分离哺乳动物细胞总RNA的分离 细胞的裂解提取步骤注意事项  这一从培养的单层哺乳动物细胞中分离RNA的实验程序系为Favaloro 等(1980)所介绍程序的改良。该程序同样适用于从悬浮培养的哺乳动物细胞中或从易于分[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:佚名点击:1014
  • 2005-4-5如何确定RNA质量的经验谈
  • 如何确定RNA质量的经验谈!1) 检测RNA溶液的吸光度280、320、230、260nm下的吸光度分别代表了核酸、背景(溶液浑浊度)、盐浓度和蛋白等有机物的值。一般的,我们只看OD260/OD280(Ratio,R)。1.82.[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:佚名点击:975
  • 2005-4-5染色体结构显示和检测
  • 染色体结构显示和检测1)  染色体显带显Q带法1.      漂洗:取经过干热预处理或已老化的染色体标本,置于pH6.0缓冲液中浸5~10分钟。2.  &nbs[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:佚名点击:1042
  • 2005-4-5培养细胞染色体显示法
  • 培养细胞染色体显示法 1)  传代培养细胞染色体显示法 1.培养细胞:取处于指数生长期、用较大瓶皿培养的、80%~90%汇合单层培养细胞。 2.加秋水仙素:使用最终浓度为0.02~0.8微克/毫升营养液,温箱继续培养6~10小时;[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:佚名点击:949
  • 2005-4-5几种常用转化细胞和转化技术
  • 几种常用转化细胞和转化技术  1)致癌化学物转化细胞:转化叙利亚地鼠胚胎细胞实验 1.取材:妊娠后第13天取材,取数个同窝胚胎,去头和内脏,在无菌条件下剪碎至米粒大小,再用0.25%胰蛋白酶(含0.01%EDTA)37℃消化30分[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:佚名点击:858
  • 2005-4-5特殊培养法
  • 特殊培养法1)二倍体细胞培养法二倍体细胞培养法与一般培养相同,关键在于传代,其传代程序为:1.      吸除旧培养液注入另瓶中。2.    &nbs[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:Bioguider点击:961
  • 2005-4-5上皮细胞培养
  • 上皮细胞培养1)表皮细胞培养1.取材:取外科植皮或手术残余皮肤小块,以角化层薄者为佳,早产流产儿皮肤更好,切成0.5~1平方厘米小块。2.EDTA处理:先置入0.02%EDTA中室温置5分钟。3.冷消化:换入0.25%胰蛋白酶中,置4℃过夜[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:Bioguider点击:1047
  • 2005-4-5结缔组织类细胞培养
  • 结缔组织类细胞培养1)成纤维细胞培养用人或动物胚体为好;动物可用小鼠或鸡胚,去头和内脏,剪成小碎块后,用胰蛋白酶消化法培养;如为人胚,可取皮肤培养。幼儿包皮是培养成纤维细胞的很好对象。 2)  巨噬细胞培养1.实验前三天[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:Bioguider点击:657
  • 2005-4-5肌组织细胞培养
  • 肌组织细胞培养1)骨骼肌细胞培养1.杀死动物,无菌取大腿肌组织,切成0.3~0.5厘米小块。2.用不含钙镁离子的Hanks液配的0.25%胰蛋白酶消化,无菌纱网或纱布滤过,合成培养基加10%小牛血清培养,为促进分化可加1%的胎汁。3.细胞接[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:Bioguider点击:809
  • 2005-4-5冻存及复苏方法
  • 冻存方法 1.细胞:选对数生长期细胞,收集细胞24小时前换液一次。 2.计数:按常规方法把细胞制成细胞悬液,计数,令细胞密度达5×106/ml,离心去上清,吸入离心管中。 3.冻存液:先用培养液9分+DMSO 1分(或甘油)配成10%的DM[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:Bioguider点击:665
  • 2005-4-5关血清使用中的常见问题解答
  • 关血清使用中的常见问题解答1.保存血清最好的办法?我们建议血清应保存在-5℃至-20℃。若你一次无法用完一瓶,建议您无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。2.如何解冻血清才不会使产品质量受损?我们建议您将血清从冷冻箱中取出后,先置于2[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:Bioguider点击:778
  • 2005-4-5常规组织培养法
  • 常规组织培养法1)初代消化培养法1.      准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。2.   [阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:Bioguider点击:1068
  • 2005-1-15磷酸钙细胞转染技术
  • 磷酸钙细胞转染技术[实验目的]1  了解细胞转染技术原理和基本方法2  磷酸钙沉淀法的基本技术要点[实验原理]磷酸钙沉淀法是基于磷酸钙-DNA复合物的一种将DNA导入真核细胞的转染方法,磷酸钙被认为有[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:Bioguider点击:1994
  • 2004-8-20PCR优化
  • 在PCR的优化开始阶段,应用新的DNA模板,引物或热稳定DNA聚合酶等材料建立的PCR方法,其扩增效果一般总不是最佳的。这种PCR反应通常要求尽量抑制非特异性扩增和(或)增加目的DNA产物的产率。表1列举了一些通常遇到的问题和对PCR反应进[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:Bioguider点击:1684
  • 2004-8-20PCR问题的总结
  • pcr产物的电泳检测时间一般为48h以内,有些最好于当日电泳检测,大于48h后带型不规则甚致消失。假阴性,不出现扩增条带  pcr反应的关键环节有①模板核酸的制备,②引物的质量与特异性,③酶的质量及活性 ④pcr循环条件。寻找原因亦应针对上[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:Bioguider点击:1155
  • 2004-8-20PCR简介及污染的处理
  • PCR技术简介  前言 一滴残留在裙子上的精液使得美国总统Bill Clinton不得不坦承他与白宫实习生有不正当的关系。因为他知道现在的生物科技就连一个精子也能被用来做为证据。这种将极微量的生物标本化为可供鉴定的现代技术正是PCR(Pol[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:Bioguider点击:1029
  • 2004-8-20细胞培养基本技术概述
  • 无菌操作基本技术 1. 实验进行前,无菌室及无菌操作台(laminar flow) 以紫外灯照射30-60 分钟灭菌,以70 % ethanol 擦拭无菌操作抬面,并开启无菌操作台风扇运转10 分钟后,才开始实验操作。每 次操作只处理一株细[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:Bioguider点击:3567
  • 2004-2-12细胞凋亡检测技术与方法
  • 细胞凋亡(Apoptosis),又称细胞程序性死亡(PCD: Programmed Cell Death),是指细胞在一定的生理或病理条件下,遵循自身的程序,自己结束其生命的过程。它是一个主动的,高度有序的,基因控制的,一系列酶参与的过程。[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:bioguider点击:1369
  • 2004-2-12Ficoll密度梯度离心法分离外周血单个核细胞
  • 测定细胞免疫功能首先要从人或动物外周血或组织中获取有活性的细胞,如淋巴细胞、巨噬细胞、粒细胞等。取得有活性的细胞应根据不同目的,采用不同方法,考虑(1)细胞纯度;(2)细胞获得量;(3)细胞活力;(4)使用方法的简易程度和本室条件等。目前常[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:金伯泉点击:941
  • 2004-2-12TUNEL labeling
  • TUNEL Labeling for 50 mm Floating Sections of Rat Brain This TUNEL procedure can be used in conjunction with Fluoro-Jade[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:bioguider点击:793
  • 2004-2-12PC12 Cell Culture and Fusion
  • PC12 Cell Culture and FusionCell CultureMaterials1. Falcon Primaria culture dishes. 2. Culture medium: DME (or F12K) wit[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:bioguider点击:666
  • 2004-2-12Western的几点经验
  • Western的几点经验 1.用脱脂奶粉封闭的效果不一定比用BSA差,不过我们试过几种奶粉,有一些奶粉不太适合.推荐使用的奶粉:雀巢高钙奶粉,多力精低脂奶粉.一般国产的奶粉的颗粒比较大,不太容易溶解.2.关于三名治:本人以前做时花很多时间在[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:bioguider点击:879
  • 2004-1-30DNA重组技术-引言
  • 引言   所谓DNA重组就是将不同来源的DNA片段连接起来,构造新的基因型的过程。通常采用目的基因和质粒载体相连接的方法。可以采用几种策略来进行外源DNA片段和质粒载体的连接。对此,可依据外源DNA片段未的性质,以及质粒载体与外源DNA上限[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:杜鸿东点击:1134
  • 2003-11-21高效液相色谱技术(HPLC)
  • 高效液相色谱(HPLC:High Performance Liquid Chromatography )是化学、生物化学与分子生物学、医药学、农业、环保、商检、药检、法检等学科领域与专业最为重要的分离分析技术,是分析化学家、生物化学家等用以[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:bioguider点击:2423
  • 2003-11-21分光光度技术
  • 基本原理利用紫外光、可见光、红外光和激光等测定物质的吸收光谱,利用此吸收光谱对物质进行定性定量分析和物质结构分析的方法,称为分光光度法或分光光度技术,使用的仪器称为分光光度计,这种分光光度计灵敏度高,测定速度快,应用范围广,其中的紫外/可见[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:bioguider点击:2434
  • 2003-11-21电泳技术发展简史
  • 4.1 电泳技术发展简史  1809年俄国物理学家Рейсе首次发现电泳现象。他在湿粘土中插上带玻璃管的正负两个电极,加电压后发现正极玻璃管中原有的水层变混浊,即带负电荷的粘土颗粒向正极移动,这就是电泳现象。  1909[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:bioguider点击:3918
  • 2003-11-20微电泳法
  • 方法:将微量的神经递质导入神经元附近,观察其作用。基本原理:外加电流通过含解离物质溶液的微电极时,会将微电极内的解离物质从管尖释放出来。如微电极接正极,头皮接负极(外向电流),阳离子物质就从微电极释出。微电泳的解离物质从微电极释出量与它通过[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:bioguider点击:901
  • 2003-11-20神经细胞培养
  • 一. 设备: 无菌操作设备。二. 大型设备CO2培养箱:恒温5%、10%CO2维持培养液中pH值。倒置显微镜:用于每天观察贴壁细胞生长情况。解剖显微镜,用于准确地取材。常温冰箱:-4℃,用于保存各种培养液,解剖液和鼠尾胶。低温冰箱:-20℃[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:bioguider点击:1502
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