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  • 2006-10-24分子生物学常用名词
  •  [原创]分子生物学名词解释大全A Abundance (mRNA 丰度):指每个细胞中mRNA 分子的数目。 Abundant mRNA(高丰度mRNA):由少量不同种类mRNA组成,每一种在细胞中出现大量拷贝。 Accepto[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:佚名点击:2544
  • 2006-8-26用于人工DNA测序凝胶产品
  • 用于人工DNA测序Long Ranger凝胶产品Long Ranger Gel Products for Manual DNA Sequencin生产商:美国 ㈠Long Ranger 50%凝胶溶液(Long Ranger 50% Gel[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:小燕点击:249
  • 2006-3-16Double in Situ Hybridization
  • (adapted from Rosen and Beddington [1993] Trends in Genetics 9, 162-167) Double in situ hybridization is performed by hy[阅读全文]
  • 来源:Rossant Lab作者:Rossant点击:322
  • 2006-3-16Whole Mount BrdU Staining
  • Dissect embryos in cold PBS containing 2 mM EGTA. Day 9 embryos and older should have the brain punctured to allow solut[阅读全文]
  • 来源:Rossant Lab作者:Rossant点击:388
  • 2006-3-16primer 5.0中文说明书
  • 上传primer 5.0中文说明书供大家分享。谢谢(没有什么特别 点击浏览该文件的东西)[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:佚名点击:988
  • 2006-3-13PCR引物设计原则
  • PCR引物设计的目的是为了找到一对合适的核苷酸片段,使其能有效地扩增模板DNA序列。因此,引物的优劣直接关系到PCR的特异性与成功与否。 要设计引物首先要找到DNA序列的保守区。同时应预测将要扩增的片段单链是否形成二级结构。如这个区域单链能[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:佚名点击:1264
  • 2006-3-9一步法提取质粒DNA
  • 一步法提取质粒DNA主要用于鉴定阳性克隆。主要步骤如下:    收集1.5mL菌体,彻底除去培养基;    加入50ulSTE缓冲液重悬菌体;  &n[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:佚名点击:953
  • 2006-3-2质粒提取的原理
  • 碱裂解法从大肠杆菌制备质粒,是从事分子生物学研究的实验室每天都要用的常规技术。可是我收研究生十几年了,几乎毫无例外的是我那些给人感觉什么都知道的优秀学生却对碱法质粒抽提的原理知之甚少。追其原因,我想大概是因为《分子克隆》里面只讲实验操作步骤[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:佚名点击:2546
  • 2006-1-19美计划进行大豆基因组测序计划
  • 普渡大学正在开展大豆基因组研究  http://www.biotech.org.cn/news/news/show.php?id=27803 美国三家机构欲联合绘出大豆基因组并将之公布于众  http[阅读全文]
  • 来源:生物通作者:不详点击:425
  • 2005-11-30如何选择下一个测序的生物?
  •         人类基因组测序基本完成、猪基因组测序完成、流感基因组测序完成,今年一个又一个的生物有机体测序完成,说明目前测序手段基本完善,而我们下一个要选择谁[阅读全文]
  • 来源:生物通作者:不详点击:409
  • 2005-11-14定点突变技术
  • 点击浏览该文件 点击浏览该文件 点击浏览该文件这是关于定点突变技术的一个小结,共分成三部分,希望对大家有帮助.[阅读全文]
  • 来源:丁香园-核酸基因技术讨论版作者:王勇全点击:1396
  • 2005-11-2高效液相层析法(HPLC)
  • 高效液相层析法的基本概念和分离理论与经典的液相色谱法及气相色谱法一致,因而其塔板理论及动力学理论等都可用于高效液相层析。   ⒈高效液相层析仪典型的高效液相层析仪包括输液系统、层析柱与检测系统三部分。流动相用一高压泵输入。这种高压泵应满足以[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:a点击:2156
  • 2005-10-12关于钙成像系统
  • Ca++离子分析系统系统介绍本公司推出的功能强大的离子分析系统,是专业进行Fura-2、Fura-3、SBFI、PBFI BCECF、Indo-1等指示剂型的胞内离子浓度测量。系统配有高速、高灵敏度冷CCD,激发光源,专业滤光片组、分光器构[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:Giant点击:3488
  • 2005-8-10 用显微镜做基因组测序(附图) 
  • 研究人员用买来的现成设备和制剂,和比常规测序成本低得多的费用,测序了一个细菌的基因组。这个DNA测序技术是几个低成本测序方法之一,这些方法也许最终能使用低于1000美元的费用测量个人的人类基因组成为现实。这个方法每碱基对的测序[阅读全文]
  • 来源:科学时报作者:不详点击:409
  • 2005-8-3活体动物体内成像技术在肿瘤学研究中的应用
  • 活体动物体内成像技术在肿瘤学研究领域的应用精诺真癌症研究系统让研究人员能够直接快速的测量各种癌症模型中肿瘤的生长和转移。活体生物发光成像能够无创伤定量检验小鼠整体的原位瘤、转移瘤及自发瘤。精诺真生物成像技术提高了检测的敏锐度,即使微小的迁移[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:佚名点击:1226
  • 2005-7-21基因测序预知未来健康状况
  •         只要通过人体的一部分组织,如血液、头发等,就可以预知将来是否会出现肿瘤、老年痴呆、急性重症心脑血管疾病等,基因测序可以做到。昨天,记者探访了江苏[阅读全文]
  • 来源:南京晨报作者:佚名点击:732
  • 2005-7-11BrdU protocol
  • BrdU protocolBromodeoxyuridine (BrdU) uses nucleotide substitution to replace thymidine with uridine in the DNA structur[阅读全文]
  • 来源:Abcam Ltd作者:佚名点击:1443
  • 2005-5-12Primer Premier 5.0 的使用技巧简介
  • Premier 5.0 的使用技巧简介功能       Premier的主要功能分四大块,其中有三种功能比较常用,即引物设计、限制性内切酶位点分析和DNA 基元(motif)查找。Premi[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:佚名点击:2790
  • 2005-5-12Blast工具的介绍和并行优化
  • Blast工具的介绍和并行优化 摘要    随着基因组计划的实施,分子生物信息迅速的增长。以核酸序列数据库为代表的分子生物信息数据正以指数增加,而对于这些实验数据在计算机上的存储检索却远远跟不上这种发[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:佚名点击:1128
  • 2005-4-6125I标记单克隆抗体技术
  • 125I标记单克隆抗体技术同位素标记是一种重要的抗体标记技术,牨977年Yalow等在放射免疫测定法所作突出贡献而获得医学和生理学诺贝尔奖。McAb标记同位素后除应用于放射免疫测定外,还可用于竞争结合试验、体内肿瘤定位等。   (一) 原理[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:Bioguider点击:894
  • 2005-4-6Northern blot技术
  • Northern blot技术经乙二醛和二甲基亚砜变性处理后进行的RNA电泳   这一方法原于McMaster和Carmichael(1977)。 含有乙二醛-DMSO的凝胶比含有甲醛的凝胶更难于进行电泳, 因为前者泳动速率较慢而且需将电泳[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:Bioguider点击:1569
  • 2005-4-6RNAi:制备siRNAs的方法
  • RNAi:制备siRNAs的方法越来越多的研究人员开始采用小分子干扰RNA(small interfering RNAs,siRNAs)来抑制特定的哺乳动物基因表达。siRNA是一种短片断双链RNA分子,能够以同源互补序列的mRNA为靶目标[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:佚名点击:1352
  • 2005-4-6RNAi实验原理与方法
  • RNAi实验原理与方法 近年来的研究表明,将与mRNA对应的正义RNA和反义RNA组成的双链RNA(dsRNA)导入细胞,可以使mRNA发生特异性的降解,导致其相应的基因沉默。这种转录后基因沉默机制(post-transcriptional[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:佚名点击:1533
  • 2005-4-6DNA序列测定技术
  • DNA序列测定技术序列测定的技术和策略Sanger双脱氧链终止法Maxam-Gilbert DNA化学降解法测序策略  目前应用的两种快速序列测定技术是Sanger等(1977)提出的酶法及Maxam和Gilbert(1977)提出的化学降[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:佚名点击:2832
  • 2005-4-6增加PCR特异性
  • 增加PCR特异性1、引物设计    细心地进行引物设计是PCR中最重要的一步。理想的引物对只同目的序列两侧的单一序列而非其他序列退火。设计糟糕的引物可能会同扩增其他的非目的序列。下面的指导描述了一个可以增加特异[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:佚名点击:1362
  • 2005-4-6PCR污染与对策
  • PCR污染与对策PCR反应的最大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性,但令人头痛的问题是易污染,极其微量的污染即可造成假阳性的产生.污染原因  (一)标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染,或标本放置时,由于密封不严溢于容器外,[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:佚名点击:1122
  • 2005-4-6PCR反应体系与反应条件
  • PCR反应体系与反应条件 -------------------------------------------------------------------------------- 标准的PCR反应体系:        10[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:佚名点击:3600
  • 2005-4-6PCR常见问题总汇
  • PCR常见问题总汇PCR产物的电泳检测时间  一般为48h以内,有些最好于当日电泳检测,大于48h后带型不规则甚致消失。 假阴性,不出现扩增条带  PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备,②引物的质量与特异性,③酶的质量及, ④PCR循环条[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:佚名点击:1442
  • 2005-4-5RNA酶活性的控制
  • RNA酶活性的控制 为了获得高质量的真核细胞mRNA, 必须使用RNA酶的抑制剂或采用下述的破碎细胞和灭活RNA酶同步进行的方法,最大限度地降低细胞破碎过程中所释放的RNA酶的活性。同时,避免偶然引入实验室内其他潜在的痕量RNA酶也很重要。[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:佚名点击:1007
  • 2005-4-5分子生物学实验基础知识
  • 分子生物学实验基础知识 分子生物学是在生物化学基础上发展起来的,以研究核酸和蛋白质结构、功能等生命本质的学科,在核酸、蛋白质分子水平研究发病、诊断、治疗和预后的机制。其中基因工程(基因技术,基因重组)是目前分子生物学研究热点,这些技术可以改[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:佚名点击:2572
  • 2005-1-6原位杂交操作规程
  • 原位杂交操作规程  (一)、仪器设备      医用微波炉; 水浴锅。     (二)、试剂      0.2[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:Bioguider点击:1395
  • 2005-1-6原位杂交
  • 原位杂交组织(或细胞)化学 (In situ Hybridization Histochemistry, ISHH) 简称原位杂交(In Situ Hybridization),属于固相分子杂交的范畴,它是用标记的DNA或RNA为探针,在原[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:Bioguider点击:2652
  • 2004-8-26核糖核酸干扰技术
  • 核糖核酸干扰技术 转录后基因沉默(PTGS, post- transcriptional gene silencing)-最初被认为仅限于矮牵牛花和其它一些植物中的奇异现象,是目前分子生物学研究中一个最热门的话题。过去几年中,科研工作者已明[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:Bioguider点击:914
  • 2004-2-12SOUTHERN BLOTS
  • SOUTHERN BLOTS 1. RESTRICTION:Use 5mg genomic DNA for Southern hybridization. Aliquot DNA in H20: Total Vol 100l .Add 10[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:Bioguider点击:751
  • 2004-1-30DNA重组技术-连接反应
  • DNA重组技术-连接反应(一)外源DNA和质粒载体的连接反应  外源DNA片段和线状质粒载体的连接,也就是在双链DNA5磷酸和相邻的3羟基之间形成的新的共价链。如质粒载体的两条链都带5磷酸,可生成4个新的磷酸二酯链。但如果质粒DNA已去磷酸[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:杜鸿东点击:1678
  • 2005-6-22DNA重组技术-感受态细胞的制备
  • DNA重组技术-感受态细胞的制备制备新鲜或冷冻的大肠杆菌感受态细胞  下述操作方案是由Hanahan(1983)提供的,所制备的大肠杆菌DHl、DH5和MM249感受态细胞培养物能使每微克超螺旋DNA以≥5x108转化菌落的频率进行转化,其[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:杜鸿东点击:1799
  • 2003-11-24RNA的抽提
  • RNA的抽提 将器皿浸泡于0.1% DEPC溶液中12小时,70-80℃烘烤干燥,103.4kPa,121℃高压灭菌15分钟,再70-80℃烘烤干燥即可使用。 将超低温保存的组织材料除去样品袋, 放在2层乳胶手套中,迅速用锤子敲成碎块,称重[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:bioguider点击:1021
  • 2003-11-24mRNA的分离纯化
  • mRNA的分离纯化离心管中秤取1克Oligo-dT纤维素,加入1×上样缓冲液 10 ml悬浮。 根据总RNA量装填Oligo-dT 纤维素柱(10mg 总RNA/1 ml 床体积),加10倍体积的Mili-Q 水洗柱,然后用10倍体积的0.[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:bioguider点击:725
  • 2003-11-24cDNA合成
  • cDNA合成1. cDNA第一链的合成 1.1 取一个0.2 ml 薄壁管,于冰浴上加入:  mRNA 模板(100ng/μl)3 μl SMART寡核苷酸1 μl CDS/3‘PCR引物1 μl混匀,短暂离心[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:bioguider点击:811
  • 2003-11-24探针的标记和标记产物的纯化
  • 探针的标记和标记产物的纯化 这里介绍三种标记方法:PCR标记、反转录标记、随机引物标记,和两种纯化方法:Microcon 30 filter法和直接沉淀法。 一、PCR标记 1、将2μg待标记的样品DNA加入到一PCR反应管中 2、在冰上,[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:bioguider点击:673
  • 2003-11-21PCR/RT-PCR疑难问题解答
  • 一、问题:RT-PCR灵敏度:在琼脂糖凝胶分析中看到少量或没有RT-PCR产物。可能原因:1.RNA被降解建议解决方法:在用来验证完整性之前先在变性胶上分析RNA使用良好的无污染技术分离RNA;在将组织从动物体取出后立刻处理在100%甲酰胺[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:bioguider点击:1371
  • 2003-11-21离子交换柱层析分离核苷酸
  • 一、实验目的本实验以酵母RNA为材料,将RNA用碱水解成单核苷酸,再用离子交换柱层析进行分离,最后采用紫外吸收法进行鉴定。同时通过测定各单核苷酸的含量,可以计算出酵母RNA的碱基组成。本实验的目的是:1. 了解掌握RNA碱水解的原理和方法2[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:bioguider点击:1726
  • 2003-11-21凝胶层析法测定蛋白质分子量
  • 一、实验目的1. 了解凝胶层析的原理及其应用。2. 通过测定蛋白质分子量的训练,初步掌握凝胶层析技术。二、实验原理凝胶层析又称排阻层析,凝胶过滤,渗透层析或分子筛层析等。它广泛地应用于分离、提纯、浓缩生物大分子及脱盐、去热源等,而测定蛋白质[阅读全文]
  • 来源:本站原创作者:bioguider点击:1916
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