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  • [分子生物学] BrdU protocol 日期:2005-07-11 20:04:01 点击:1891 好评:2

    BrdU protocol Bromodeoxyuridine (BrdU) uses nucleotide substitution to replace thymidine with uridine in the DNA structure of dividing cells both in vitro and in vivo (Gage, 2000). BrdU has been utilised in a number of in vitro and in vivo...

  • [分子生物学] Primer Premier 5.0 的使用技巧简介 日期:2005-05-12 23:36:07 点击:3938 好评:19

    Premier 5.0 的使用技巧简介 功能 "Premier"的主要功能分四大块,其中有三种功能比较常用,即引物设计、限制性内切酶位点分析和DNA 基元(motif)查找。"Premier"还具有同源性分析功能,但并非其特长,在此略过。此外,该软件还有一些特殊功能,其中最重要的是...

  • [分子生物学] Blast工具的介绍和并行优化 日期:2005-05-12 12:43:34 点击:1899 好评:2

    Blast工具的介绍和并行优化 摘要 随着基因组计划的实施,分子生物信息迅速的增长。以核酸序列数据库为代表的分子生物信息数据正以指数增加,而对于这些实验数据在计算机上的存储检索却远远跟不上这种发展。因此我们需要对原来的生物学数据处理工具进行研究和...

  • [分子生物学] 125I标记单克隆抗体技术 日期:2005-04-06 14:19:27 点击:930 好评:0

    125 I标记单克隆抗体技术 同位素标记是一种重要的抗体标记技术,牨977年Yalow等在放射免疫测定法所作突出贡献而获得医学和生理学诺贝尔奖。McAb标记同位素后除应用于放射免疫测定外,还可用于竞争结合试验、体内肿瘤定位等。 (一) 原理 氯胺桾即对甲苯碘氯胺...

  • [分子生物学] Northern blot技术 日期:2005-04-06 14:15:21 点击:1654 好评:0

    Northern blot技术 经乙二醛和二甲基亚砜变性处理后进行的RNA电泳 这一方法原于McMaster和Carmichael(1977)。 含有乙二醛-DMSO的凝胶比含有甲醛的凝胶更难于进行电泳, 因为前者泳动速率较慢而且需将电泳液时行循环以避免电泳过程中形成过高的H+梯度。尽管...

  • [分子生物学] shRNA文库:RNA干扰研究者的福音 日期:2005-04-06 13:37:20 点击:2073 好评:0

    shRNA文库:RNA干扰研究者的福音 Nature 428, 427 - 431 (25 March 2004); doi:10.1038/nature02370 A resource for large-scale RNA-interference-based screens in mammals PATRICK J. PADDISON1,*, JOSE M. SILVA1,*, DOUGLAS S. CONKLIN1,*,, MIKE SCHLA...

  • [分子生物学] RNAi:制备siRNAs的方法 日期:2005-04-06 13:18:45 点击:1501 好评:0

    RNAi:制备siRNAs的方法 越来越多的研究人员开始采用小分子干扰RNA(small interfering RNAs,siRNAs)来抑制特定的哺乳动物基因表达。siRNA是一种短片断双链RNA分子,能够以同源互补序列的mRNA为靶目标降解特定的mRNA,这个过程就是RNA干扰途径(RNA interfe...

  • [分子生物学] RNAi实验原理与方法 日期:2005-04-06 13:18:05 点击:2017 好评:0

    RNAi实验原理与方法 近年来的研究表明,将与mRNA对应的正义RNA和反义RNA组成的双链RNA(dsRNA)导入细胞,可以使mRNA发生特异性的降解,导致其相应的基因沉默。这种转录后基因沉默机制(post-transcriptional gene silencing, PTGS)被称为RNA干扰(RNAi)。 一...

  • [分子生物学] DNA序列测定技术 日期:2005-04-06 12:27:21 点击:3275 好评:2

    DNA序列测定技术 序列测定的技术和策略 Sanger双脱氧链终止法 Maxam-Gilbert DNA化学降解法 测序策略 目前应用的两种快速序列测定技术是Sanger等(1977)提出的酶法及Maxam和Gilbert(1977)提出的化学降解法。虽然其原理大相径庭,但这两种方法都是同样生成...

  • [分子生物学] 增加PCR特异性 日期:2005-04-06 00:09:51 点击:1438 好评:0

    增加PCR特异性 1、引物设计 细心地进行引物设计是PCR中最重要的一步。理想的引物对只同目的序列两侧的单一序列而非其他序列退火。设计糟糕的引物可能会同扩增其他的非目的序列。下面的指导描述了一个可以增加特异性的引物所具有的令人满意的特点: 1.典型的...

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