聚抗原肽微阵列分析平台的建立与初步应用

摘要：

        基于多肽设计合成技术建立了一个快速、高通量、自动化的多聚抗原肽微阵列分析平台.  选取人巨细胞病毒  (HCMV)的包膜糖蛋白B和被膜碱性磷酸蛋白PP150，幽门螺杆菌  (Helicobacter  pylori，Hp)  尿素酶  (Ure)  β亚基为靶蛋白，分析筛选出优势线性表位序列，Fmoc法固相合成上述线形表位的多聚抗原肽(MAPs)，高效液相色谱仪  (HPLC)  纯化后，用机器人点样仪按一定的矩阵排列形式点印至硝酸纤维素膜上，2%的小牛血清封闭，塑料壳体封装制备成MAPs微阵列成品.  随机抽样经质控血清鉴定后用于随机人群血清试验并与ELISA  检测结果进行比较.  筛选、合成并鉴定出4  条MAPs.  用该MAPs微阵列检测的Hp和HCMV阳性及阴性质控血清结果均与质控血清情况相符，120份随机血清检测结果与用重组抗原和病原微生物裂解物抗原包被的ELISA  法检测结果相比具有较好的一致性，Ure-1、Ure-2  和PP150  三种MAPs的灵敏度和特异性均大于90%.  MAPs微阵列片间质控试验结果变异系数小于7%，示重复性良好.  MAPs微阵列是一种快速、高通量、自动化的分析平台，该平台在预防性疫苗的开发和蛋白质组学的研究中具有较大的前景。

关键词：多聚抗原肽，多肽合成，微阵列

作者：徐小洁    张虎明    李  丁    韩锋产    张文红  郭慧芳    温冬青    罗  进    阎小君    康  磊

第四军医大学基因技术诊断研究所，肿瘤生物学国家重点实验室，西安  710032

全文见附件1 (责任编辑：泉水)

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