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韩春雨详解NgAgo基因编辑技术新版实验方法要点

2016-08-11 17:00 未知 南方都市报 阅读 0
核心摘要: 河北科技大学副教授韩春雨提交了NgAgo基因编辑技术的新版详细实验方法,并补充了多项注意事项,回应了此前实验结果无法被重复的质疑。新版实验方法在血清品牌、细胞处理、质粒/gDNA共转染时间等方面进行了调整,并强调了避免细胞污染和EDTA使用的重要性。

河北科技大学副教授韩春雨于8月8日向非营利性质粒共享信息库Addgene提交了NgAgo基因编辑技术的新版详细实验方法,并补充了多项注意事项。此前,韩春雨领导的课题小组发明的NgAgo-gDNA基因编辑技术曾引起广泛关注,但随后因全球范围内无实验室成功重复其实验结果而受到质疑。

韩春雨在接受南方都市报采访时表示,新版实验方法是在与其他科学家讨论后得出的,其中最有价值的部分是提出了一些注意事项,如避免细胞污染等。韩春雨认为,新旧实验方法在原则上无本质区别,但新版方法增加了一些需要特别注意的事项。

新版实验步骤的变化

新版实验步骤有几处变化:1. 血清品牌由Hyclone变更为Gibco;2. 增加了关于293T细胞贴壁不牢的提示;3. 质粒/gDNA共转染的时间从24小时变更为8小时、12小时或24小时;4. 溶解和稀释质粒及gDNA的缓冲液从含有EDTA的0.5xTE变更为水(pH 8.0)。此外,还补充了四条注意事项,包括避免细胞污染、避免使用金属离子螯合剂EDTA等。

争议仍未止息

尽管韩春雨提交了新版实验方法,但争议仍未平息。一些研究者认为,新版实验方法并不具备足够的说服力,问题的关键在于如何达到论文中21%-41%的基因编辑效率。另一些研究者则认为,新版实验方法中关于避免EDTA的影响的提示或许是关键。

《自然-生物技术》的回应

《自然-生物技术》发言人表示,将按照既定流程调查韩春雨的研究,并要求作者提供材料、数据、代码和相关的实验流程。截至目前,尚未取得可公开的调查进展。

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