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三、裸鼠在生物医学研究中的应用(2)

时间:2006-06-24 16:42来源:大众医药网 作者:admin 点击: 411次

  先天性无胸腺裸鼠的遗传因素,免疫动物原缺陷指标以及剖检所见和组织学观察等特征,均与人类免疫缺陷性疾病中的原发性细胞免疫病相似。各品系裸鼠因遗传背景的不同,所表现的细胞免疫反应和实验室检查指标亦各不相同。这些裸鼠种群是研究人类各种免疫缺陷性疾病的发病机理和遗传规律的动物模型。实验动物遗传学家已育成具有不同免疫缺陷特性的近交系小鼠达50余种。我国所应用的自发性免疫缺陷小鼠,主要应用的是BALB/C遗传背景的裸鼠,个别实验室也应用了NIH、ICR等非近交系裸鼠。

  (四)病毒、细菌、寄生虫感染机制的研究

  无胸腺裸鼠的T淋巴细胞缺损,免疫机能低下,是研究病毒、细菌及寄生虫感染机制的极好模型动物。如可用于研究乙型脑炎SA14-14-ZHK7减毒株为乙脑活毒疫苗的选育株,在正常小鼠体内可产生符合规定的免疫原性(LD50),而在胸腺缺少或胸腺发育不良的生物个体免疫原性如何,对于今后现使用具有参考价值。实验结果可见表4-3,以BALB/C(+/+)小鼠为对照。

表4-3 乙脑弱毒株免疫实验结果

小鼠种类

(BALB/C)

鼠龄

(天)

弱毒株

批 号

弱毒含量

TCD50

免疫

免疫后两周攻击

动物数

(只)

皮下注射

0.1ml针次

腹腔注射10-5

0.3ml针次

LD50

有胸腺嫌

(+/+)

30

SA·14-14-

ZHk·7

7.0

21

1

1

0.000303

无胸腺鼠

(nu/nu)

30

SA·14-14-

ZHk7

7.0

16

1

1

0.012

  以上结果说明,乙脑病毒感染后所产生的免疫力,主要属于细胞免疫,如使T细胞缺陷的裸鼠体内产生与免疫功能正常小鼠同等水平的免疫力,必须加大40倍的免疫剂量,才能达到。也说明裸鼠体内还存在着残余的T淋巴细胞。由此推论,在现场人群中产生抗体水平较低者,其T细胞功能是否缺陷,应作为因素之一加以探讨。

  裸鼠已被证明是研究T淋巴细胞功能缺损下,分枝杆菌感染的最好模型,其肿瘤的自发率极低。

  (五)生物制品和药品的检定

  生物制品(疫苗、菌苗)的安全性的免疫原性是制品必不可少的内容之一。它涉及制品是否有潜在制癌性、感染因子以及它的毒力是否有返祖的可能性。特别是在应用动物组织培养疫苗或人类二倍体细胞株时,对检出这些细胞潜在的致癌性、某些制品引起的异常发应及其发生机理、对药物致癌性或抗癌药物的研究等诸方面,先天性胸腺机能缺陷的裸鼠是很好的动物模型和实验手段。

  (六) 微生物学上的研究

  以往人类麻风杆菌只有背上够九条纹的犰狳(Armadillo)身上才能生长,而这种产于南美等地的动物难于寻找,也不易饲料和操作。1975年Colston等将麻风杆菌接种于裸鼠足掌,发现麻风杆菌可大量繁殖,全身扩散,引起瘤型麻风。这为研究麻风杆菌的生物特性、免疫原性和麻风病发病机理提供了极为有用的实验模型。

  又如淋巴细胞性脉络膜脑膜炎(LCM)病毒经脑内接种于无本病毒隐性感染的正常小鼠,可引起脑膜炎,感染细胞被当作靶细胞而受到破坏,在脑、脊髓内发生了明显的细胞免疫反应,但在T细胞缺损的裸鼠所见却完全相反,未导致动物的死亡,仅出现持续病毒血症,体内不出现LCM抗体,也无任何免疫反应。

  (七)内分泌和老年医学上的应用

  在人工摘除胸腺动物,大多数研究可见脑下垂体、甲状腺、肾上腺、性腺等出现异常。有人用无特定病原体环境中的饲料的裸鼠和正常小鼠进行研究,分析3、9、11周龄的雌雄动物的脑下垂体生长激素及甲状腺、肾上腺皮质和性腺的功能,结果发现两者间未见有统计学上的差别。

  在老年医学的研究上,有人认为裸鼠没有T细胞,容易引起自身免疫现象,皮肤的可溶性胶原(Collaggen)也减少,因此认为胸腺、自身免疫、老化三者之间是有关系的。但这方面也有不同论点。

  (八)目前国内应用裸鼠开展的研究课题简况

  1.T和NK细胞免疫功能缺陷型——Beige裸鼠育成及其基本特征的研究。

  2.非近交系615/PBI-beige/nude小鼠免疫功能的初步研究。

  3.T和NK细胞联合缺陷型小鼠体内人类肿瘤移植瘤的转移研究。

  4.免疫缺陷型动物(裸鼠)体内人类肿瘤癌生长和转移的研究。

  5.裸小鼠腹腔内筛选高转移性人肺腺癌细胞及其生物学特性的研究。

  6.Urethane诱发BALB/c裸小鼠肺腺癌及其在裸小鼠皮下生长转移的特性。

  7.五种人癌细胞株裸小鼠移植转移特性的初步研究。

  8.裸鼠人体恶性黑色素瘤模型的建立和病理观察。

  9.三株人肺癌裸小鼠移植模型长期传代的形态观察。

  10.裸小鼠可移植性人肺癌瘤株的建立及其生长特性和微细的结构的观察。

  11.裸鼠体内传代及体外培养的人小细胞肺癌细胞系的建立。

  12.人肺巨细胞癌PLA-801群体细胞及其克隆化细胞株(A、C、D、E)裸鼠皮下种植后自发转移特性的研究。

  13.人脑胶质瘤细胞系裸小鼠实体瘤模型NHG-1的建立及其特征的研究。

  14.人脑室管膜瘤转移植于裸小鼠的实验研究。

  15.两株裸大鼠人肝癌模型的建立和生物学特性的观察。

  16.人胃癌裸鼠移植模型的建立及其生物学特性的初探。

  17.人胃腺癌裸鼠动物模型的建立。

  18.615裸鼠体内建立的人Burkitt淋巴瘤细胞株。

  19.人直肠粘液腺瘤裸鼠移植瘤株的建立及传代的初步小结。

  20.裸鼠人体原发性肝癌生长动力学的一些特点及其甲胎球蛋白分泌的研究。

  21.流式细胞仪(Flow Cytometer)在裸鼠人体鼻咽癌生物学特性研究中的应用。

  22.外放射顺铂及混合细菌疫苗多模型综合治疗对裸鼠人肝癌的实验研究。

  23.裸鼠人肝癌模型在肝癌导向研究中的应用。

  24.抗胶质瘤的McAb在人脑胶质癌裸小鼠模型NHG-1中的导向研究。

  25.核素导向内放射合并高温对裸鼠人肝癌的治疗作用。

  26.影响裸小鼠B淋巴细胞体外转化因素的初步探讨。

  27.裸小鼠诸器官及血清双向电泳“蛋白图”。

  28.裸小鼠血浆氨基酸测定。

  29.三种人脑瘤裸小鼠模型的染色体初步分析。

  30.应用裸鼠净化支原体污染细胞的初步观察。

  31.裸鼠肝炎病理观察及分析。

  32.裸鼠人体原发性肝癌实验资料的计算机处理。

  33.小型SPF裸鼠实验室的建立及其在临床肿瘤实验中的应用。

  34.用人肺腺癌移植瘤进行快速药敏试验。

  35.人癌裸鼠移植瘤宿主血清中唾液酸及唾液酸糖蛋白含量变化的研究。

  36.平阳毒素和博来霉素A6对裸鼠移植的人体肝癌和胃癌的抑制作用。

  37.人低分化鼻咽癌上皮细胞株裸小鼠移植模型的研究。

  38.裸鼠饲料灭菌方法探讨。

  39.裸小鼠繁育与质量控制的初步报告。

  40.SPF小鼠实验动物室的建立及繁殖应用研究。

  41.裸鼠室的建立及裸鼠的繁育。

  42.NC裸小鼠的繁育与人脑瘤移植。

  43.免疫抑制小鼠模型的建立及人类大肠癌细胞株HRT-18的异种移植研究。

  44.人类肿瘤细胞系裸小鼠体内移植的综合研究。

  45.人癌移植于裸小鼠的实验研究。

  46.无胸腺裸小鼠的皮肤病研究中的应用。

(责任编辑:泉水)
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