ELISA法检测幽门螺杆菌抗体的临床意义 本研究用间接ELISA法检例患者和健康输血员血清中抗HpIgA、IgG同时还检测了胃粘膜中的Hp,以探讨Hp抗体测定的临床意义。 1 材料和方法 1.1 材料 本组217例患者经胃镜及胃粘膜组织学诊断为十二指肠球部溃疡(DU)48例,胃溃疡(GU)27例,慢性萎缩性胃炎(CAG)18例,慢性清表性胃炎(CSG)96例,复合性溃疡(CU)7例,胃癌(GCa)14例,胃粘膜正常2例。慢性胃炎中活动性胃炎(ACG)54例,非活动性(NACG)60例。所有患者均抽取空腹静脉血,此外还收集了80例健康输血员血清测抗HpIgA、IgG。 1.2 方法 ①胃粘膜内Hp菌检测活检粘膜直接涂片检查及Hp的分离培养鉴定均参照张振华所报道的方法。②ELISA方法:从患者胃粘膜中培养出的7株Hp菌分离纯化,超声粉碎后在4℃下1500g离心30min,取上清蛋白定量后作抗原。用50mg/ml的抗原包被聚苯乙稀反应板,用间接ELISA法测定,每板均设标准阳性和阴性对照,将两者OD值用作为质控,每板此值之差在±0.5范围内。结果用特测标本OD值与标准阳性OD值之比来表示,该比值在血清IgA≥0.6,在IgG≥0.5为阳性,在胃液IgA≥0.145为阳性。③吸收抑制试验:用7例在ELISA试验中高效价IgA、IgG的Hp感染者的血清混合后从1:10开始对倍稀释至1:160,然后分别用Hp、空肠弯曲菌(CJ)及大肠杆菌完整的细菌和Hp抗原吸收后,按上述方法做ELISA。 计数资料用卡方检验,计量资料用t检验。 2 结果 Hp阳性患者血清中抗HpIgA、IgG含量均显著高于Hp阴性者(P<0.01)。与细菌学比较其敏感性分别为92.1%和95.7%,特异性分别为91.1%和88.5%,符合率分别为71.7%和93.2%(表1)。可以看出不同疾病之间的血清抗HpIgA和LgG含量有显著差异(P<0.01),两组比较发现血清IgA含量在ACG组显著高于除CU外的其它各组(P<0.05,P<0.01),消化性溃疡各组显著高于NACG组(P<0.01),2例组织学正常者IgA、IgG分别为0.44和0.37,80例健康输血员血清抗HpIgA,IgG的含量和阳性率均显著低于ACG,GU,DU及GCa组(P<0.01,P<0.05)。研究表明,血清Hp抗体与胃炎的严重程度有关,中重度胃炎血清抗HpIgA,IgG的阳性率为82.4%和79.0%,显著高于轻度胃炎的45.6%59.7%(P<0.01,P<0.05)。但Hp抗体含量和阳性率在浅表性胃炎和萎缩性胃炎之间无显著差异(P<0.05表2)。 表1 胃粘膜内Hp和血清Hp抗体的比较
表2 各种胃部疾病血清抗HpgA,IgG比较
Hp阳性患者胃液中抗HpIgA显著高于Hp阴性者(P<0.01),与细菌学结果比较敏感性,特异性与符合率分别为96.4%92.9%和95.3%(表3)。 表3 胃粘膜内Hp的检出率和胃液抗HpIgA的比较
不同疾病之间胃液抗HpIgA含量有显著差异(表4,P<0.01),两组比较发现ACG组、消化性溃疡各组和CGa组显著高于NACG组(P<0.05)。此外中重度胃炎胃液抗HpIgA的阳性率为76.6%,显著高于累度胃炎的40.0%(P<0.05)。 表4 各种胃部疾病胃液抗HpIgA结果
无论是完整的Hp菌还是超声粉碎提取的Hp抗原与Hp阳性血清共同温育后都能使血清中抗HpIgA和IgG效价明显下降,而用大肠杆菌和Cj吸收后的血清抗体仅有少许下降,此结果证明本试验具有特异性。 (责任编辑:泉水) |