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实验室常用技术参数资料

时间:2005-04-15 00:14来源:本站原创 作者:bioguider 阅读:

实验室常用技术参数资料

  一、核酸及蛋白质常用数据

1.核苷三磷酸的物理常数

化合物

分子量

λmax(pH7.0)

1摩尔溶液(pH7.0)中λmax时的最大吸收值

OD280/OD260

ATP

507

259

15400

0.15

CTP

483

271

9000

0.97

GTP

523

253

13700

0.66

UTP

484

262

10000

0.38

dATP

494

259

15200

0.15

dCTP

467

271

9300

0.98

dGTP

507

253

13700

0.66

dTTP

482

267

9600

0.71

2.常用核酸的长度与分子量

核酸

核苷酸数

分子量

λDNA

48502(双链环状)

3.0×107

pBR322

4363(双链)

2.8×106

28SrRNA

4800

1.6×106

23SrRNA

3700

1.2×106

18SrRNA

1900

6.1×105

19SrRNA

1700

5.5×105

5SrRNA

120

3.6×104

tRNA(大肠杆菌)

75

2.5×104

3.常用核酸蛋白换算数据

  (1)重量换算

  1μg=10-6g      1pg=10-12g

  1ng=10-9g      1fg=10-15g

  (2)分光光度换算:

  1A260双链DNA=50μg/ml

  1A260单链DNA=30μg/ml

  1A260单链RNA=40μg/ml

  (3)DNA摩尔换算:

  1μg 100bp DNA=1.52pmol=3.03pmol末端

  1μg pBR322 DNA=0.36pmol

  1pmol 1000bp DNA=0.66μg

  1pmol pBR322=2.8μg

  1kb双链DNA(钠盐)=6.6×105道尔顿

  1kb单链DNA(钠盐)=3.3×105道尔顿

  1kb单链RNA(钠盐)=3.4×105道尔顿

  (4)蛋白摩尔换算:

  100pmol分子量100,000蛋白质=10μg

  100pmol分子量50,000蛋白质=5μg

  100pmol分子量10,000蛋白质=1μg

  氨基酸的平均分子量=126.7道尔顿

  (5)蛋白质/DNA换算:

  1kb DNA=333 个氨基酸编码容量=3.7×104MW蛋白质

  10,000MW蛋白质=270bp DNA

  30,000MW蛋白质=810bp DNA

  50,000MW蛋白质=1.35kb

  100,000MW蛋白质=2.7kb DNA

4.常用蛋白质分子量标准参照物

(1)高分子量标准参照 (2)中分子量标准参照 (3)低分子量标准参照
肌球蛋白 分子量 磷酸化酶B 97,400 碳酸酐酶 31,00
肌球蛋白 212,000 牛血清白蛋白 66,200 大豆脻蛋白酶 21,500
β-半乳糖甘酶B 116,000 谷氨酶脱氢酶 55,000 抑制剂  
磷酸化酶B 97,400 卵白蛋白 42,700 马心肌球蛋白 16,900
牛血清白蛋白 66,200 醛缩酶 40,000 溶菌酶 14,400
过氧化氢酶` 57,000 碳酸酐酶 31,000 肌球蛋白(F1) 8,100
醛缩酶 40,000 大豆脻蛋白酶 21,500 肌球蛋白(F2) 6,200
    抑制剂   肌球蛋白(F3) 2,500
    溶菌酶 14,400    

5.常用DNA分子量标准参照物

λDNA/HindⅢ

λDNA/EcoRⅠ

λ/HindⅢ+EcoRⅠ

pBR322/HaeⅢ

23130

21226

21227

587

123

9416

7421

5148

405

104

6557

5804

4973

504

89

4361

5643

4268

458

80

2322

4843

3530

434

64

2027

3530

2027

267

57

564

 

1904

234

51

125

 

1584

213

21

   

1375

192

18

   

974

184

11

   

831

124

7

   

564

   
   

125

   

续上表

pBR322/HinfⅠ

φχ174/HinfⅠ

φχ174/Hae Ⅲ

φχ174/TapⅠ

1631

726

140

1353

2914

517

713

118

1078

1175

506

553

100

872

404

396

500

82

603

327

344

417

66

310

231

298

413

48

281

141

221

311

42

271

87

220

249

40

234

54

154

200

24

194

33

75

151

 

118

20

     

72

 

  二、常用缓冲液

  1.分子克隆常用缓冲液

  2.磷酸缓冲液

  (1)25℃下0.1mol/L磷酸钾缓冲液的配制

pH

1mol/L K2HPO4(ml)

1mol/L KH2PO4(ml)

5.8

8.5

91.5

6.0

13.2

86.8

6.2

19.2

80.8

6.4

27.8

72.2

6.6

38.1

61.9

6.8

49.7

50.3

7.0

61.5

38.5

7.2

71.7

28.3

7.4

80.2

19.8

7.6

86.6

13.4

7.8

90.8

9.2

8.0

94.0

6.2

  (2)25℃下0.1mol/L磷酸钠缓冲液的配制

pH

1mol/L Na2HPO4(ml)

1mol/L NaH2PO4(ml)

5.8

7.9

92.1

6.0

12.0

88.0

6.2

17.8

82.2

6.4

25.5

74.5

6.6

35.2

64.8

6.8

46.3

53.7

7.0

57.7

42.3

7.2

68.4

31.6

7.4

77.4

22.6

7.6

84.5

15.5

7.8

89.6

10.4

8.0

93.2

6.8

  ※:用蒸馏水将混合的两种1mol/L贮存液稀释至1000ml,根据Henderson-Hasselbalch方程计算其pH值:

(责任编辑:泉水)
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