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技术分享帖-脑片膜片钳实验流程

时间:2012-08-05 09:34来源:网络 作者:未知 点击: 701次

记录前的准备:

实验室一

剥脑前准备:

取冰于冰盒在冰箱冷冻,冰盒盖子打开

倒剩余脑脊液于一大烧杯备用

冰冻好后放入冰盒内,注意弄碎冰盒内冰先

冰冻好后取切片槽于冰箱冰冻

将切片液与装脑空小杯放于冰盒

打麻药前:

取琼脂

取修块用培养皿于实验台,培养皿加少许纯水打湿后取下,用纯水冲洗培养皿

放滤纸,502

载脑台放于试验台,注意擦干上面的水

两刀片一于修块培养皿,一于切片机,刀片有胶一面向下

用勺取切片液于小杯,留一个坑,刚没过脑为宜,再加少许切片液

吸管,刷子放于试验台

大杯内切片液通氧,注意不要使冰堵住气孔

切琼脂

开切片机电源

取手术器械和纸于水池边备用

打麻药后:

取切片槽,粘通氧气管

加切片液,先加冰后加水

上切片槽,调整刀片至适当位置

放冰盒于水池边

取脑

取脑后:

载脑台涂502

粘琼脂

倒切片液于培养皿,下放一滤纸

取脑,切脑,粘脑

将载脑台放入切片槽,调节刀片高度

切脑完毕后的整理:

取一张吸水纸用于放洗后刀片

切完后,通氧至备用脑脊液杯,上盖塑料手套

剩余冰去水后倒至另一冰盒,装一半冰于冰箱,不盖盖

把放修块培养皿盒子内的水倒掉,擦干后放入冰箱

切片机用纯水冲两遍,擦干

所有器械用具用自来水冲洗完毕后,用纯水再冲两遍,或者用纯水泡,完了摆放整齐

 

实验二:

剥脑前准备:

开氧气

取切片液于孵育杯和切片液杯中,均通氧,其中切片液杯通氧15min

取冰于冰盒,内放切片液杯,载脑台(擦干上面水)和手术器械(大剪刀,小剪刀,大镊子,小镊子)

戴手套

开切片机,放一部分冰于切片机槽

取刀片,用酒精擦拭刀片,上刀片于切片机槽

取盛脑培养皿,修块培养皿,麻药,胶水,修脑刀片于相应位置备用

剥脑、切片:

取小鼠,打麻药,量为50

加切片液于修脑培养皿

小鼠麻醉后,剪脑,剥脑(中间一刀,两边各一刀)

冲洗大剪刀,涂胶水

修块(倾斜一定角度),粘脑

将载脑台放入切片机,加入切片液,往冰槽里加自来水

切脑完毕后整理:

将盛脑片杯放入水浴锅,孵育半小时后取出

切片机取下刀片,放掉冰槽内的水,用自来水冲洗后,用纯水冲一遍

切脑刀片刮下载脑台上剩余胶水和脑,然后一起扔掉

所有器械用自来水冲洗后放入相应位置摆好

 

记录:

实验室一:

开电源

切加液针头(切细线,各种技巧……)

开仪器,先开电脑

开电极拉制仪

取脑片找细胞

吸电极内液,拉电极

膜片钳操作(略)

实验室二:

离心管内装入脑脊液,调节灌流系统

取电极内液针管于试验台

拉电极

取脑片,找细胞,膜片钳实验

 

试验后整理:

实验室一:

关气

关仪器

取下电极头

各种器械清洗,然后纯水冲两遍

冲洗完后用擦镜纸吸干高倍镜上水,吸水纸吸干载脑台上水

关电源

 

实验室二:

关气

关仪器

擦镜纸擦干高倍镜头

纯水冲洗灌流系统

各种器械清洗,自来水既可

 

 

 

(责任编辑:泉水)
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