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待检测样品制备(3)

时间:2006-06-21 16:47来源:大众医药网 作者:admin 点击: 1004次
K1334-1 CHROMA SPIN-1000 DEPC-H2OColumns(20)
K1334-2 CHROMA SPIN-1000 DEPC-H2OColumns(50) 纯化>1350bp的DNA分子;纯化lambda DNA、酵母基因组DNA和其他大分子;从质粒中去除各种蛋白和RNA;除去<500bp的cDNA

  另外,有的研究人员习惯用酚氯仿抽提纯化核酸,除了对人体有害,酚氯仿抽提的另一个问题是:为避免将中间层的蛋白杂质或有机相连同上清一起吸出,往往需要弃去一部分上清不要,这种情况会造成相当一部分样品损失,特别是小体积的酚抽提。所以我们在这里介绍一个新产品,相信大家一定会喜欢:Eppendorf公司的Phase Lock Gel(Affymetrix推荐!)只要将酚氯仿和样品的混合物加入预装有Phase Lock Gel的管子里,离心,这种专利的化合物就会在水相和有机相之间形成一层致密的固体,将中间层的蛋白杂质和下层有机相完全锁在固体之下,你可以轻松的吸出全部水相样品,提高回收率而不用担心混入杂质,也不用担心酚氯仿会不小心流出来。对于大体积的样品抽提,还可以直接将全部水相倒出而有机相依然被牢牢“锁定”在管底不会流出。Phase Lock Gel不会影响常规的酶反应,你可以在装有Phase Lock Gel的管子里进行酶切,加热失活,再进行酚抽,离心后酚被锁在固相之下,再直接加入酚氯仿抽提,再离心,Phase Lock Gel会重新在新的水相和有机相之间形成固体,将全部有机溶液锁在固体层之下,相当方便。Phase Lock Gel分为PLG Heavy和PLG Light两种,前者适用于碱法提质粒、RNA抽提等杂质较多(粘稠)的情况(不适合纯酚抽提),后者适用于酶切反应、cDNA合成、标记反应和常规组织Genomic DNA纯化(Mouse tail除外),适用于纯酚、酚氯仿、氯仿抽提。

(责任编辑:泉水)
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