我们热爱生命科学!-生物行
当前位置: 主页 > 生物技术 > 基本实验

免疫细胞化学常用试剂介绍(2)

时间:2005-07-29 00:08来源:本站原创 作者:ppx007 点击: 1923次

  PB和PBS是免疫细胞化学实验中最为常用的缓冲液,0.01mol/L的PBS主要用于漂洗组织标本、稀释血清等,其pH应在7.25~7.35之间,否则需要调整。0.1mol/L的PB常用于配制固定液、蔗糖等。一般情况下,0.2mol/l PB的pH值稍高些,稀释成0.01mol/L的PBS时,常可达到要求的pH值,若需调整pH,通常也是调PB的pH。

  3.Karasson –Schwlt’s磷酸盐缓冲液

  试剂: NaH2PO4·H2O  3.31g

  Na2HPO4·7H2O     33.77g

  重蒸水         至1000ml

  配制方法:同前

  该缓冲液主要用于配制Zamboni’s固定液。

  4.0.5mol/L pH7.6的Tris- HCl缓冲液。

  试剂:Tris(三羟甲基氨基甲烷)  60.57g

  1N HCl             约420ml

  重蒸水             至1000ml

  配制方法:先以少量重蒸水(300~500ml)溶解Tris,加入HCl后,用1N的HCl或1N的NaOH将pH调至7.6,最后加重蒸水至1000ml。此液为储备液,于4℃冰箱中保存。免疫细胞化学中常用的Tris-HCl缓冲液浓度为0.05mol/L,用时取储备液稀释10倍即可。

  该液主要用于配制Tris缓冲生理盐水(TBS)、DAB显色液。

  5.Tris缓冲生理盐水(Tris Buffered,Saline,TBS)

  试剂:0.5mol/L Tris-HCl缓冲液   100ml

  NaCl               3.5~9g(0.15mol/L)

  重蒸水              至1000ml

  配制:先以重蒸水少许溶解NaCl,再加Tris-HCl缓冲液,最后加重蒸水至1000ml,充分摇匀使Tris终浓度为0.05mol/L。

  TBS主要用于漂洗标本,常用于免疫酶技术中。

  6.Tris-TBS(PBS)

  试剂:Triton X-100       10ml(1%)或3ml(0.3%)

  0.5mol/L Tris缓冲液(pH7.6)  1000ml(50ml)或(0.2mol/L的PB)

  NaCl              8.5~9g

  重蒸水             至1000ml

  配制方法:先以重蒸水少许溶解NaCl后,加入Triton X-100及Tris缓冲液或(PB),最后加重蒸水至1000ml,充分摇匀。

  该液常用浓度为1%及0.3%,前者主要用于漂洗标本,后者主要用于稀释血清。

  7.0.1mol/L(pH7.4)二甲胂酸缓冲液

  试剂:0.2mol/L二甲胂酸钠      500ml

  0.1N HCl              28ml

  蒸馏水               至1000ml

  配制方法:先称取二甲胂酸钠(MW:214)42.8g,加蒸馏水至1000ml,使0.2mol/L的二甲胂酸钠溶液;再取HCl 1.7ml加蒸馏水至1000ml ,配成0.1N,最后 取0.2mol/L二甲胂酸钠溶液500ml及0.1n HCl 28ml混合,加蒸馏水至1000ml,即为0.1mol/L的二甲胂酸钠缓冲液。

(责任编辑:泉水)
顶一下
(4)
100%
踩一下
(0)
0%
------分隔线----------------------------
发表评论
请自觉遵守互联网相关的政策法规,严禁发布色情、暴力、反动的言论。
评价:
表情:
用户名: 验证码:点击我更换图片