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对幽门螺杆菌有效中西药物的筛选

时间:2006-07-01 21:56来源:大众医药网 作者:admin 点击: 309次

对幽门螺杆菌有效中西药物的筛选

  在中药方剂胃忧愈治疗消化性溃疡及伴发幽门螺杆菌(Hp)相关性慢性胃炎取得良好效果,Hp清除率50%的基础上,根据中医理论和临床实践,参照中药研究成果,应用药敏试验方法对清热解毒及可能具有抗菌作用的20种中药进行筛选,选择对Hp有较好抑制作用者制成灭Hp胶囊。选用14种对Hp有效抗生素及各种药物联合进行药敏试验,进一步筛选疗更佳的联合用药组合方案。

  1 材料和方法

  1.1 材料

  Hp菌株分离培养:Hp菌株来自本院胃镜室胃镜检查的慢性胃炎和消化性溃疡患者幽门前区粘膜组织钳取物,直接接种于空肠弯曲菌选择性培养基(英格兰Unipath公司产品)上,置微氧环境,37℃培养72h,检查菌落,革兰染色为阴性杆菌,尿素酶、氧化酶、过氧化氢酶试验阳性。选择从不同患者胃内分离的菌株,生长良好者8株做为药敏试验菌。

  1.2 方法

  每种药物或联合用革均进行8株从不同个体分离的Hp菌株的敏感试验。平均抑菌直径10mm以内为轻度敏感;10mm~20mm为中度敏感;20mm以上为高度敏感。

  1.2.1 有效西药的筛选

  将四环素、痢特灵、庆大霉素、红霉素、甲硝唑、De-Nol、羟氨苄青霉素、氟呱酸、氟嗪酸,氨苄青霉素、先锋必素、复达新、西力欣、菌必治14种药物各0.1g,加无菌蒸馏水1ml制成10%溶液。将直径5mm药敏纸片浸入药液,浸透后取出,分别装于干燥无菌瓶内置37℃孵箱内烘干,灭菌后分别贴于已接种好Hp菌的血琼脂平板上,置微氧环境,37℃培养48h,测量抑菌直径。将上述药液0.1ml分别和De-Nol或(和)甲硝唑0.1ml混合,再将上述14种药物按排列组合方法组成3种不同药物的联合,取各种不同的药液各0.1ml相混合,按上述方法进行药敏试验。

  1.2.2 有效中药的筛选

  将黄连、黄柏、白芍、大黄、连翘、黄芩、白花蛇舌草、乌梅、双花、赤芍、三七、公英、地丁、丹皮、生地、水牛角、川朴、丹参、人参、龙胆草各10g,加水100ml,煎至10ml。将“胃忧愈”5倍浓缩粉剂,锡美散各10g加水50ml,加热煎至10ml,双层纱布过滤,为100%(g/v)原汁。将直径5mm灭菌药敏纸片,无菌操作在高压灭菌后的中药原汁中完全浸泡,浸透后取出,然后贴于已接种好Hp菌的血琼脂平板上,置微氧环境,37℃培养48h,检测抑菌直径。将人参,丹参,“胃忧愈”原汁0.5ml分别与以上单味中药原汁0.5ml混合。再将20种单味中药按排列组合方法,组合成三种药物的混合液(每种0.3ml)进行试验。

  2 结果

  西药敏感试验中所选药物在培养基上的中度和高度敏感(表1)。四环素、痢特灵、甲硝唑、De-Nol先锋必素为中度敏感;庆大霉素、氨苄青霉素、氟呱酸、红霉素、羟氨苄青霉素、氟嗪酸、复达新、西力欣,菌必治为高度敏感。本文所选药物中,De-Nol与甲硝唑单一抑菌直径为19.88mm±1.21mm,14.50mm±0.74mm,与四环素(21.25±0.78),痢特灵(21.75±1.04),先锋必素(17.63±1.04),羟氨苄青霉素(23.75±0.96)联合则非常显著的增加这几种药物的抑菌作用,较单一用药差异非常显著(P<0.01)。也显著增加氨苄青霉素(25.50±1.82)、氟呱酸(25.13±1.47)、西力欣(24.25±1.12)、菌必治(26.13±1.76)的抑菌作用(P<0.05)。De-Nol和甲硝唑联合再与所有单一药物联合均非常显著的增加抑菌作用(P<0.01或P<0.05)。联合用药较单一用药抑菌作用增强,这可能与抗生素的作用方式不同而产生协同作用有关。也是克服Hp对某种药物原发耐药的有效方法。三种药物排列组合药物效果,与含De-Nol和甲硝唑的三联药敏效果相比,其效果未见更佳者。另因De-Nol具有杀灭Hp感染仍应采用含De-Nol和甲硝唑的联合治疗。复达新、西力欣、菌必治对Hp抑制作用强,在培养基上单一抑菌效果与其他药物的三联抑菌效果相似,今后如在临床治疗中也达到与三联用药相似的疗效,也可成为一类较好的抗Hp药物。

表1 西药敏感试验结果     (抑菌直径mm,x±s

药物

单一药物

与De-Nol联合

与甲硝唑联合

与De-Nol+甲硝唑联合

四环素

16.38±0.43

21.25±0.72b

18.25±1.04b

23.13±0.96b

痢特灵

12.25±1.26

21.75±1.04b

16.63±0.16b

21.63±1.22b

庆大霉素

21.13±0.94

21.88±1.64

22.13±0.75

24.50±1.27b

甲硝唑

14.50±0.74

20.63±1.57b

 

 

De-Nol

19.88±1.21

 

21.50±0.48b

 

氟呱酸

24.25±1.24

25.13±1.47

23.63±1.67

25.88±2.14b

红霉素

20.50±0.96

21.75±1.05

20.88±1.52

22.63±1.76b

羟氨苄

21.25±0.80

23.75±0.96b

22.63±1.62a

26.38±2.03b

先锋必素

15.38±1.25

17.62±1.64

17.50±1.14b

20.38±1.16b

氟嗪酸

23.38±1.52

22.38±0.74

22.13±1.37

25.13±0.84b

氨苄清

21.33±0.32

22.13±0.63

25.50±1.82b

24.50±2.14b

复达新

25.25±1.62

25.50±2.14

29.88±1.32

26.50±2.32a

菌必治

24.63±1.24

26.13±1.76a

25.63±1.48a

26.88±2.16b

西力欣

23.50±0.98

24.25±1.12a

24.88±1.32a

25.88±2.37b

  aP<0.05,bP<0.01,υs单一药物。

  通过对20种中药的敏感试验,证实在培养基上丹皮、乌梅、大黄、三七、黄连、黄柏、白芍、丹参对Hp均具有抑制作用(表2)。人参与黄连(7.50±0.12),黄柏(7.38±0.08)、白芍(7.25±0.04),三七(7.63±0.22)、丹皮(9.63±0.38)联合可轻度增加抑菌作用,但无统计学意义(P>0.05)。可使连翘(7.00±0.04),龙胆草(7.25±0.06),白花蛇舌草(7.00±0.02)等出现轻度抑菌作用,丹参与黄柏联合可显著增加抑菌作用(10.10±0.24,P<0.05),也可使黄连(8.25±0.13)、乌梅(8.38±0.21)、白芍(7.38±0.08)、大黄(8.68±0.14)、丹皮(9.63±0.21)抑菌作用增加,但无统计学意义(P>0.05)。胃忧愈与8种有效中药联合可显著增加抑菌作用(8.13mm±0.16mm~12.63mm±0.15mm,P<0.01或P<0.01)。三种中药联合较单味中药有与人参、丹参的联合用药抑菌作用增强(P<0.01)。

表2 中药敏感试验结果(抑菌直径mm x±s

药名

单味中药

与人参联合

与丹参联合

与胃优愈联合

三种药物联合

 

黄连

7.38±0.32

7.50±0.12

8.25±0.13

10.13±0.23*

黄连黄柏乌梅

13.38±0.42

黄柏

7.25±0.24

7.38±0.08

10.10±0.24a

9.63±0.74

黄连赤芍白芍

11.25±0.34

乌梅

8.13±0.41

8.00±0.02

8.28±0.15

12.63±0.16b

黄连丹皮乌梅

13.63±0.14

白芍

7.00±0.08

7.25±0.04

7.38±0.80

10.00±0.14b

大黄丹皮乌梅

13.38±0.26

三七

7.50±0.23

7.63±0.32

7.25±0.08

10.50±0.52b

乌梅丹皮丹参

12.13±0.14

大黄

8.38±0.34

8.13±0.16

8.63±0.14

10.25±0.16a

丹皮三七乌梅

10.50±0.63

丹皮

9.23±0.48

9.63±0.30

9.63±0.21

12.25±0.26b

丹皮三七乌梅

10.38±0.12

丹参

6.88±0.12

6.88±0.14

 

8.13±0.16a

大黄丹皮白花蛇

10.25±0.33

  aP<0.05,bP<0.01,υs单味中药。

(责任编辑:泉水)
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