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可诱导性真核表达载体构建成功为观察肿瘤奠定基础

时间:2005-11-01 09:03来源:中国医药报 作者:bioguider 点击: 241次
  日前,第四军医大学西京医院普通外科的研究人员采用金属硫蛋白-Ⅱ型(MT-Ⅱ)启动子,并以适量的Zn2+诱导启动下游基因绿色荧光蛋白(GFP)大量转录,成功构建了以GFP作为筛选标记并可稳定转染的可诱导性真核表达载体。  

  如何简便、快速、经济地了解和提高目的基因的转染效率,并筛选出转基因细胞,是目前基因治疗研究中的重要课题,而选择一种理想的报告基因和标记基因是解决此问题的关键。源于维多利亚水母的GFP是新近发现的一种报告基因。GFP由238个氨基酸组成,它们在各种真核细胞中都可作为定位各种蛋白质的标记物。  

  西京医院普通外科的研究人员将GFP克隆到可诱导性真核表达载体pMD-neo上,从而构建成携带绿色荧光蛋白的可诱导性真核表达载体pMD-GFP。随后,他们又采用脂质体转染法,将GFP基因转入HCC-9204细胞中。通过荧光显微镜观察他们发现,在被转入GFP基因的HCC-9204/GFP细胞中,荧光均匀地分布于整个细胞--这样就可以非常便捷地筛选出转染基因细胞。  

  据研究人员介绍,携带绿色荧光蛋白的可诱导性真核表达载体的构建,为进一步观察人体内肿瘤的生长和转移打下了基础。 (责任编辑:泉水)
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