绪论 一、细胞生物学的概念 二、细胞生物学的学科地位 既是基础学科,又是前沿学科 三、细胞生物学的主要研究内容 * 细胞的结构与功能:细胞核,染色体以及基因表达的研究 生物膜与细胞器的研究 细胞骨架体系的研究 细胞的生命活动:细胞的增裂、细胞的分化、细胞的衰老与凋亡、细胞的起源与进化、细胞工程 四、研究细胞生物学有重要的意义 * 1. 揭示生命活动的规律 发育、衰老等 2. 为工农医服务 单克隆抗体技术、动物克隆、组织工程、肿瘤等
五、细胞学与细胞生物学的发展简史 1. 细胞的发现 技术:显微技术 学者:Z. Jansen和H. Jansen,R. Hooke, A. V. Leeuhoek
2. 细胞学说的建立
技术:显微技术 学者:M. J.Schleiden和T. Schwann 成果:提出了细胞学说 3. 细胞学的经典时期 技术:显微技术、石腊切片技术和染色技术;观察与描述 学者:普金耶、雷马克、弗勒明、高尔基等 成果:发现了多种细胞器与细胞的分裂活动
4. 实验细胞学与细胞学的分支
技术:实验手段 学者:孟德尔、摩尔根等 成果: 细胞遗传:受精现象、核质关系、遗传三大规律 细胞生理:组织培养技术 细胞化学: (化学染色、放射自显影技术免疫荧光技术等)细胞的化学组成
5. 细胞生物学学科的形成与发展
技术:电子显微镜技术、超薄切片技术、分子生物学技术等 学者:Ruska,Waston和Crick 成果:细胞的超微结构与细胞分子生物学 第二章 细胞基本知识概要 第一节 细胞的形状与大小 一、细胞的概念 细胞是由原生质小团所组成的基本单位,其中含有一个核(或拟核),四周被膜包围着。 二、细胞的形状多样 有球状、柱状、纤维状、纺垂体状等。 形状的维持:细胞骨架和某些细胞的胞壁 三、细胞的大小千差万别 测量方法与使用的单位 大小悬殊:最小支原体,最大的驼鸟卵细胞 四、细胞形态大小与细胞的功能是相适应的 1.细胞的大小有一定的限制 2.细胞的形态与功能相适应 哺乳动物红细胞 神经细胞 骨骼肌细胞 第二节原核细胞与真核细胞 一、原核细胞与原核生物 在原核细胞内含有DNA的区域,没有核膜包围,这个区域为拟核,其中只有一条DNA。原核细胞中没有内质网、高尔基体、线粒体和质体等,但含有核糖核蛋白体、间体、粒状物、类囊体和蓝色体等。原核细胞细胞质中的内含物有气泡,多磷酸颗粒、脂肪滴和蛋白粒等。由原核细胞构成的生物称原核生物,如支原体、细菌、蓝藻和放线菌等。
(一)支原体 (二) 细菌
1.形状 2.结构 鞭毛 荚膜 细胞壁 细胞膜 中膜体 拟核 核糖体 质粒 芽孢 3 生理功能 (1)能量转换 (2)蛋白质合成 (3)与外界环境的物质交换 (4)繁殖方式 (5)运动 3 蓝藻 1 概述 2 形态 3 结构 胶质鞘 细胞壁 细胞膜 光合片层 藻胆蛋白体 中心质
4 光合作用 光合色素: 藻蓝素和叶绿素a等 特点:电子供体为水,可放出氧气。 细胞分裂:隔壁分裂 二、真核细胞的基本结构 概述 1 真核细胞的基本结构体系 ¿ 以脂质及蛋白质成分为基础的生物膜结构系统; ¿以核酸(DNA或RNA)与蛋白质为主要成分的遗传信息表达系统 ¿由特异蛋白分子装配构成的细胞骨架系统。 ˜动物细胞与植物细胞的区别 细胞壁 液泡 叶绿体 病毒(非细胞结构) 1.病毒的概念: 2. 病毒的核酸类型 3. 病毒的形态与结构 乙肝病毒 SARS病毒 4. 病毒在宿主细胞中的增殖 病毒的侵入 粘附— 特异性结合---内吞、融合或注入 病毒核酸的侵染 脱壳— 释放核酸 病毒核酸的复制、转录与翻译 病毒的装配成熟与释放 自我装配 释放 病毒的复制(右图为SARS病毒) 第三章 细胞生物学研究方法 概述 形态结构观察方法 光学显微镜技术、电子显微镜技术与扫描隧道电子显微镜技术 细胞组分的分析方法 离心技术、细胞化学技术、免疫技术、分子杂交技术、放射自显影技术、显微分光光度测定技术与流式细胞仪。 细胞工程技术 细胞培养技术、显微操作技术与细胞融合技术
一、光学显微镜技术 (一)普通复式光学显微镜技术 分辨率的概念。 分辨率: 指能够分辨清的两点之间的最小距离。可由下式表示: 两物点的最小分辨距离D=0。61λ/N.sinα/2 。λ为成像光线的波长,N为样品周围介质的折射率,α/2是进入物镜光锥的半角,,Nsinα/2 为物镜的数值孔径(常用N.A.表示),用于测定物镜的分辨率。数值孔径越大,能够分辨出二物点之间的距离则越小,因而分辨率就越强。光学显微镜的最小分辨距离为 0.2微米 提高分辨率的方法: 显微镜的基本调试操作:
(二)荧光显微镜技术 激发光(紫外光或蓝紫光)与发射光(荧光) 免疫荧光技术与荧光素直接标记技术 激发滤片与阻断滤片
(三)激光共聚焦扫描显微镜技术 成像的原理:只有物镜焦平面处的切面成像。
(四)相差显微镜技术 普通复式光学显微镜的成像特点 明暗反差或颜色反差 相差显微镜的成像原理及应用 相差显微镜 利用物体不同结构成分之间的折射率和厚度的差别,把通过物体不同部分的光程差转变为振幅(光强度)的差别,经过带有环状光阑的聚光镜和带有相板的相差物镜实现观察的显微镜。
光的衍射与干涉 活细胞的观察 相差显微镜的主要构件 相差显微镜的光路图 相差显微镜成像 直射光(超前1/4波长) 共轭面 入射光 环状光栏 标本 衍射光 补偿面
目镜 成像
共轭面与补偿面的功能(一般情况): 共轭面使直射光振幅减小80%左右,相位(光程差)延滞1/4波长。 补偿面通过衍射光。 结果:合光振幅增大,物像比背景亮,形成明反差。
二、电子显微镜技术 概述 分辨率: 2-4A 放大倍数: 100多万倍 亚显微结构:
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