化学组成 叶绿体外被(膜)的化学组成:蛋白质和脂类,糖脂与磷脂较多。类囊体:蛋白质:脂类=60:40 ;脂类中不饱和脂肪酸较多,膜的流动性较强;蛋白质分布与线粒体蛋白质分布比较相似。基质: 光合作用中电子传递及光合磷酸化
吸收光能在PSⅡ和PSⅠ的配合下,把一对电子从H2O 传递给NADP+,电子传递呈Z 型。光合磷酸化的类型:非循环式,循环式。 光合磷酸化与氧化磷酸化的区别 光合作用中暗反应 利用光合反应中产生的ATP 及NADPH 来生成糖类.(CO2 的固定) 叶绿体的半自主性和起源 均于线粒体相似;植物细胞的三套遗传系统。 第五讲细胞核的结构与功能 概述 1831 年,Brown 发现,胞内最大的细胞器。真核细胞:均有,除了成熟的筛管和红细胞。原核细胞:拟核。细胞生活周期形态结构不是一成不变。 形态 圆球状,卵形,形态也会变化。核质系数(NP)=V 核/(Vcell-V 核) 比值变大→细胞分裂。 构成单位 核被膜;遗传物质;核仁。 A.核被膜(Nuclear envelope) 组成 外膜内质网特化区。内膜核周池 20-40nm,与内质网相通。核纤层网状纤维蛋白,30-160nm, laminaA B C。维持细胞核的形状;与细胞分裂相关;核被膜的破裂与重构。核孔两层核膜融合区域。间期细胞普遍存在 60 个/μm; 每核达3000 万。 核孔复合物 孔环颗粒Annular granules; 边围颗粒Peripheral granules; 中央颗粒centre granules。 功能 核质物质交换双向选择性通道 核孔形成柱状通道 9nm 15nm 蛋白质运输:核定位信号(Nuclear localization signal) RNA 特殊机理
B. 遗传物质 几对名词 染色质与染色体chromatin and chromosome:编码基因,重复序列(DNA 指纹技术) 常染色质与异染色质euchromatin and heterochromatin:细胞分裂间期存在形态结构异染色质与功能异染色质constitutive and faculative ... B. 遗传物质 染色质的基本结构单位核小体 核小体结构 (nucleosome) 1.核心结构:四种组蛋白; 2.左手螺旋缠绕1.75 圈,147bp; 3.H1 位于两核小体中间,与DNA 双链结合,成2 圈,共165bp; 4.连接两核小体的DNA 长度为35bp,故形成200bp 的结构单位; 5.染色质上的核小体成念珠状。 组蛋白 分子量(kDa) 氨基酸组成 保守性 每200bpDNA 的分子数 H1 20 富含Lys 差 N、C 端变化大 1 H2A 137 Lys 中等,中部C 端,疏水 种间差异 2 H2B 137 Lys 中等,中部,疏水 种间差异 2 H3 157 富含Arg、Cys 进化保守 2 H4 112 富含Arg 最保守 2 个AA 2
组蛋白富含碱性氨基酸,易与酸性的DNA 紧密结合。 染色体的四级模型
10nm→30nm 形成过程 10nm 及30nm 螺线管示意图(见上页核小体结构左图) 中期染色体的形态结构 依据形态分类 metacentric chromosome;submetacentric chromosome ; subtelocentric chromosome;telocentric chromosome 。
基本构成着丝粒(centromere) or 动粒(kinetochore):主缢痕;动粒结构域(kinetochore domain);中央结构域(centre domain) ; 配对结构域(pairing domain);次缢痕(secondary constriction) ; 端粒(telomere)。 C. 核仁(Necleolus)的结构与功能 概述 核仁的超微结构 纤维中心(fibrillar centers FC):染色浅,低电子密度,不活跃的rDNA; 致密纤维中心(dense fibrillar component DFC):染色深,电子密度高,活跃 的rDNA; 颗粒组分(grannlar component GC):核糖体亚单位前体颗粒。 结论:FSc:非转录状态的沉默rRNA 基因储存位点; DFC:rRNA 基因进行活跃转录位点; GS:核糖体亚单位装配成熟位点。 核仁的功能--核糖体的生物发生 核仁周期 第六讲细胞骨架 发现 最初,基质(cytosol)均质溶液相,细胞运动形态等? 1928 年,Klotzoff 原始概念锇酸或高锰酸钾染色电镜无。 1963 年,戊二醛常温染色电镜下有网状骨架。 概论 细胞骨架:真核细胞胞质中的蛋白纤维网架体系。 狭义 (cytoskeleton) 三种蛋白纤维:微丝(microfilament,MF);微管(microtubule,MT); 中间纤维
华东理工大学《细胞生物学》上课讲义 (intermediate filament,IF)。 广义 (cell skeleton) 胞质骨架(cytoskeleton); 核骨架或核基质(karyoskeleton or nuclear matrix) 目前通俗,细胞骨架--cytoskeleton:真核细胞胞质中由三类纤维蛋白微丝、 微管和中间纤维组成的蛋白纤维网状骨架体系,对于维持细胞形态、细胞运动、 物质与能量交换、信息传递等生命活动有重要作用。 本讲主要介绍cytoskeleton 的三种蛋白纤维及相关的生理功能,同时对核 基质作简单学习。 A.微管(microtubule) 存在于真核细胞中,由微管蛋白(tubulin)组装成的长管状细胞器结构,通 过亚单位的组装与去组装,能改变其长度,对低温与秋水仙素敏感,在细胞内呈 网状或束状分布,并能与其它蛋白共同组成纺锤体,基体,中心粒,鞭毛和纤毛 等,维持细胞形态、细胞运动等,原核细胞中无此结构。 形态与组成 外径24-26nm;内径15nm;壁厚6nm;管状纤维。 管蛋白a 和b 少量微管结合蛋白(microtubule associated proteins,MAPs) a 和b 形成二聚体,13 根原纤维 管蛋白a 和b;50kDa 种间保守性非常强;管蛋白a 有N(nonexchangeable site) 位点;管蛋白b 有E(exchangeable site)位点 管蛋白相关因子 *GTP:能与N、E 位点相结合 *二价阳离子:Ca2+解聚 Mg2+ 促进装配 *作用药物:秋水仙素:疏水凹槽,二聚体不能聚合;紫杉醇和重水:促进微管 装配,但对细胞有毒。 动态装配 体外装配 体外装配条件: 微管蛋白浓度>临界浓度。 最适pH:pH6.9 离子:无Ca2+, Mg2+适当,1M 温度:37℃,低温解聚; 临界浓度:微管蛋白必须高于 某一浓度,低于则不发生装配,该浓度称为临界浓度。微管两端的临界浓度和平 衡常数均是不同,正极和负极。 GTP 的重要作用 *GTP 与二聚体的N,E 位点结合,装配到微管的b 亚单位上; *装配完成后,E 位点的GTP 会水解成GDP,这种二聚体不稳定,会解聚; *当GTP-tubulin 聚合速度远大于GTP 的水解速度时,末端不断加入大量 GTP-tubulin,使微管稳定延长,出现“GTP-cap”现象; *随着GTP-tubulin 的消耗,末端聚合速度会下降,则GTP 水解成GDP,因而
华东理工大学《细胞生物学》上课讲义 GTP-cap 会变小直至消失,暴露出GDP-tubulin,微管开始解聚; *踏车行为:在某中GTP-tubulin 下,表现出微管的(+)极聚合,(-)极解聚,并 且速度相等,从而微管长度保持不变。(整个结果是表现为微管在移动)。 体内装配 自我调节 微管组织中心(microtubule organizing centre,MTOC) 在生理或实验处理解聚后,微管重新发生装配的区域。动物中的中心体,鞭毛和 纤毛的基体,硅三藻的纺锤极体均是MTOC,MTOC 决定了微管的极性。 微管结合蛋白(microtubule associated proteins,MAPs) MAP1 MAP2 tau 蛋白促进微管组装,抑制解聚 功能 维持细胞形态 秋水仙素处理的细胞变球形,微管破坏,表面张力最小。 胞内运输 驱动蛋白(kinesin):利用ATP 水解释放的能量向正极运输小泡; 动力蛋白(dyenin):能反向向负极运输物质。 鞭毛与纤毛的运动 鞭毛与纤毛的区别: 结构:细长毛状与基体;轴线结构:9+2 结构,A-13,B-10 鞭毛与纤毛的运动机理 基体与中心体 中心体(centrosome):动物细胞中的主要微管 组织中心,纺锤体与胞质微管均有中心体放射 出来,中心体有一对垂直的中心粒构成。通常 鞭毛与纤毛的基体也是有中心粒构成。 三种微管区别 染色体运动功能 B. 微丝(microfilament) 成份 肌动蛋白:43kD, 三种异构体 a、b、g, 进化上极其保守,平滑肌、心肌等,375 个AA,只差4-6 个AA。 动态装配 由球形肌动蛋白(G-actin)单体形成的多聚体螺旋状纤维,37nm;G-actin 有极 性,装配成纤维时,头尾相连,微丝(MF)有极性。 装配条件:Mg2+ G-actin ATP →装配;Ca2+ 较低Na+或K+→解聚成G-actin; Mg2+ Na+或K+高浓度→成纤维。 装配过程:种子形成,延长阶段,延迟时间,微丝极性。 ATP 的作用:ATP→G-actin 1:1;ATP-actin 装配;装配后,actin 构象会改变, 使ATP→ADP+Pi;ADP-actin 易解聚;ATP-cap;踏车行为。
华东理工大学《细胞生物学》上课讲义 微丝结合蛋白 在微丝结合蛋白的参与下形成许多亚细胞结构如应力纤维等,肌肉细丝等。 主要的微丝结合蛋白及功能如下: 特异性药物 细胞松弛素;鬼笔环肽。 功能 肌肉收缩 微绒毛 应力纤维 胞质溶胶与阿米巴运动 胞质分裂环 C.中间纤维(Intermediate filamnet) 成份 中间纤维的类型: 角质蛋白纤维(keratins) :分子量(kD)40-68; 多肽数19; 细胞类型:上皮, 包括各种角蛋白丝;(头皮指甲)神经胶质细胞。 波形蛋白纤维(vimentin):分子量(kD)54;多肽数1;细胞类型:成纤维细 胞,上皮细胞,软骨细胞淋巴细胞。 结蛋白纤维(desmin) :分子量(kD)53;多肽数1; 细胞类型:骨骼肌,心肌, 平滑肌。 神经元纤维蛋白:细胞类型:神经元。 神经胶质蛋白纤维(GFAP):分子量(kD)51; 多肽数1; 细胞类型:神经胶质细 胞。 组织特异性,应用于临床诊断肿瘤发生部位。 特征 杆形区:310 AA,a 螺旋,7 个AA 重复排列,a 和d 位为疏水AA。 头尾部:非螺旋区,高度可变。 装配 相邻亚基螺旋区→二聚体; 二聚体→四聚体,中间纤维的最小亚单位; 八个四聚体或四个八聚体进一步螺旋成中间纤维; 整个装配过程中IF 是不具有极性的,两端是对称的。 核纤层与IF 结合蛋白
核纤层蛋白与IF 蛋白有相似结构:350AA 的内部区段与IF 蛋白螺旋区高度同源; 类似大小的非螺旋头尾部;也为10nm 左右的纤维并且具有25nm 的纵向周期。 IF 结合蛋白:与IF 功能密切相关,紧密或疏松结合于IF 上或两端。 功能 无特异性药物的作用,故功能研究不如前两者透彻,主要:外与细胞膜和细胞外 基质直接联系;向内与核表面,核基质联系;中间与MT、MF 及其他细胞器相联。 总结 细胞骨架主要成份比较 微管微丝中间纤维 主要组成成份 ab 结合蛋白 G-actin 结合蛋白 多种类型 分子量 50kD 43kD 40-200kD 亚单位管蛋白球蛋白线状蛋白 结合核苷酸 2GTP/二聚体 1ATP/单体无 纤维直径 -22nm -7nm -10nm 结构 13 根原丝组成的空心 管状纤维 单股a 螺旋多级a 螺旋 极性有有无 可溶性 亚单位库 有有无 踏车行为有有无 特异性药物 秋水仙素、长春花碱 紫杉醇 细胞松弛素 鬼笔环肽 无 与运动有关的 结合蛋白 动力蛋白 驱动蛋白 肌球蛋白无 D.核骨架 存在于真核细胞核内,以蛋白成份为主的纤维网架体系。 核骨架与DNA 复制 染色质DNA 以放射环形式与DNA 复制的酶及其他因子锚定于核骨架,形成DNA 复合体进行复制。 核骨架是DNA 复制的空间支架。 核骨架与基因表达 染色质DNA 上发现有核骨架结合序列,一般位于活性转录基因的两端,富含AT。 与核骨架结合后能使该区段的染色质空间解聚,从而有利于RNA 聚合酶的识别与 移动,保证基因处于高活性状态。 E.细胞骨架功能 细胞形态支撑与形态的建成;细胞内转运或运动;膜相关的性质和功能;吞噬作 用;信息传递。
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