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流式细胞仪实验方法(6)

时间:2005-04-05 13:16来源:本站原创 作者:bioguider 阅读:
(责任编辑:泉水)

R&D推荐量使用荧光抗体

正常的激活T淋巴细胞IL-4表达通常<2%,应使用PEAPC标记

通透后细胞在胞内染色前未洗

按操作程序通透后洗细胞再胞内染色

 

背景染色太高

荧光单抗不纯或荧光与抗体结合不牢导致解析出的荧光染料非特异结合

使用R&D 试剂

使用试剂阻断Fc受体可以有效减少非特异荧光染色,详见Fc段受体阻断节

抗体与固定后的胞内抗原亲和力低,需提高抗体浓度。

使用R&D试剂并按推荐剂量

 

错误的同型对照,对照Ig浓度过高

R&D推荐量使用R&D匹配的同型对照试剂

 

严重的细胞损失

洗涤离心步骤丢失细胞

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