逆转录病毒信号序列 |
与包装蛋白的成分形成复合物感染哺乳动物细胞 |
PKG-Puro |
哺乳动物细胞中转染稳定性的选择 |
氯霉素 |
细菌筛选标记 |
同源重组位点 |
通过同源重组将shRNA表达框转入载体 |
Zebrafish Morpholino Library(斑
马鱼) 文库
Expression Arrest Zebrafish Morpholino文库由美国著名的Gene Tools, LLC公司开发,Open Biosystems是该公司的独家代理。通过该模式生物可以为科研工作者提供了解译基因功能的途径。
吗啉寡聚核苷酸(Morpholino oligonucleotides,MF)
吗啉寡聚核苷酸(MF)是非离子型DNA类似物,其中的核糖被吗啉所代替,磷酸二酯键被phosphoroamidate所代替,可从Gene Tools LLC公司(Corvallis,OR,USA)购得。最近,已经有综述介绍了它在应用上的成功和局限性,尤其聚焦于发育生物学上的应用,因为大多数发表的关于吗啉复合物的文章是用斑马鱼胚胎进行研究的。Genesis杂志的整个一期(volume30,issue3,2001)都是关于利用这项技术进行的基因功能研究。
用MF对斑马鱼胚胎中广泛表达的GFP基因(转基因产物)在所有的细胞中进行了敲除。在这项研究中建立了等量的已知基因突变和人类疾病模型,利用MF确定了一些新的基因功能。有报道说MF可以纠正突变的b球蛋白前体mRNA的错误剪接,具有潜在的治疗意义。用与错误剪接位点互补的寡聚核苷酸处理地中海贫血病人外周血中的红细胞祖先,可以纠正错误剪接,提高血色素A的合成。
Catalog Number: PZF1245 - Individual Zebrafish Morpholino
Zebrafish Morpholino文库包括上千个寡核苷酸序列,每个寡核苷酸序列都是针对目标序列的转录起始位点而设计的,可以快速诱导基因表达水平的下调。Morpholinos寡核苷酸特异性非常高并且具有核酸酶抗性,因此其可以长效地、特异性诱导目标基因的表达下调。
Morpholino一般与目标基因起始位点的序列互补(大概互补区间长度在25-50个碱基左右),每个寡核苷酸都通过质谱检测验证,无菌包装运输。购买时,每个morpholino的量是50 nM(冻干粉)。
· 特异性与目标基因的起始位点互补
· 高核酸酶抗性
· 可单独购买,也可以96-well板形式购买
· 到货周期短
果蝇 RNAi 文库
Catalog Number:
RDM1189 - Drosophila RNAi Collection
RDM1190 - Individual RNAi Constructs
RNAi出现为研究果蝇的基因功能提供了新的途径。Openbiosystem公司提供的果蝇RNAi文库包括7,000 DNA序列,可以直接用来体外转译产生RNA。该文库中的dsDNA可以覆盖果蝇基因组的50%以上。对于每个基因,均采用特异性引物扩增其外显子序列(约300-600个碱基)。DmRNAi结构包括两个T7启动子,无RNase,可直接用于体外转译研究。
Open Biosystems提供的dsDNA在一次体外转录反应就可以产生ug级的dsRNA,260/280的比值在1.8以上。