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DNA面临两大强敌——紫外线和化学致癌物质，它们可通过突变单个核苷酸或改变其物理结构对DNA造成严重破坏。生物体依赖特定蛋白修复特定类型的损伤，以维持基因组完整性。来自麻省理工学院（MIT）的研究人员发现，毛发硫营养不良症组分A（TTDA）在DNA修复和转录过程中发挥重要作用。该成果发表于5月的《PLoS Biology》杂志。

核苷酸切除修复（NER）机制涉及约25种蛋白，它们协同识别并切除损伤结构，包括紫外线诱发的损伤。该修复机制的核心是一种由10个亚基组成的转录/修复因子IIH（TFIIH）复合体，它除了修复DNA外，还参与转录调控。

TTDA是三种与毛发硫营养不良症（TTD）相关的TFIIH基因（XPB、XPD和TTDA）之一。TTD是一种罕见的光敏性遗传早衰综合征，特征包括毛发和指甲脆弱、鳞状皮肤及神经退化。

为研究TTDA亚基在TFIIH复合体中的功能，Giuseppina Giglia-Mari等人用绿色荧光蛋白（GFP）标记TTDA和XPD亚基，通过高分辨率共聚焦显微镜观察其运动和行为。结果显示，TTDA-GFP与XPD-GFP稳定结合形成TFIIH并参与DNA修复；与仅定位于细胞核的XPB不同，TTDA-GFP和XPD-GFP在细胞质和细胞核中均可见。为验证细胞质中TTDA和XPD是否与TFIIH结合，研究人员采用光脱色荧光恢复技术（FRAP），观察到TTDA动态结合TFIIH，且仅在NER过程中稳定结合，而非转录过程。

Giglia-Mari等人得出结论：核心TFIIH复合体吸附到DNA损伤处后，TTDA进入正确位置，引发构象改变，招募其他修复亚基。TTDA还帮助TFIIH正确折叠，防止其降解，并积累TFIIH至NER所需水平。这些观察解释了为何无法产生TTDA的患者会出现衰弱症状。（生物通：张迪）

附：光脱色荧光恢复技术（FRAP）是研究膜流动性的方法。首先用荧光物质标记膜蛋白或膜脂，然后用激光束照射细胞表面某一区域，使荧光淬灭形成漂白斑。由于膜流动性，漂白斑周围的荧光物质逐渐扩散覆盖漂白斑，使淬灭区域亮度恢复至与周围相等。

细胞膜蛋白标记方法多样，可用非特异性染料如异硫氰酸荧光素（FITC）标记全部膜蛋白，或用特异性探针如荧光抗体标记特定膜蛋白。标记后，用激光束局部照射使荧光脱色，形成直径约1μm的白斑。若膜蛋白可移动，白斑因蛋白移动而消失；若不可移动，则白斑持续存在。

根据荧光恢复速度，可推算膜脂扩散速度约为每秒几微米，而膜蛋白扩散速度变化较大，少数可达膜脂速度，多数较慢，部分完全局限于特定区域。这种限制形成膜微区，具有不同蛋白组成和功能，体现了膜蛋白不对称分布带来的功能不对称。

FRAP技术存在局限：仅能检测膜蛋白群体移动，无法观察单个蛋白移动；且不能证明移动是否受局部条件限制。为此，发展了单颗粒示踪（SPT）技术，用抗体金（直径15-40 nm）标记单个膜蛋白，通过计算机控制的摄像显微镜观察。