本文介绍了植物种子在实验室条件下的培养方法,包括种子消毒、接种和培养的具体步骤。 种子消毒步骤: 1. 用70%乙醇冲洗30秒。 2. 置于1%漂白剂(次氯酸钠,添加少量Tween-20)中5分钟。 3. 用无菌水洗涤2-4次,每次1分钟。 接种和培养: 1. 将消毒后的种子悬浮在0.1%的无菌琼脂糖中。 2. 在无菌操作台中,将4ml种子悬浮液涂布在含有0.8%琼脂糖和1/2 MS10培养基的培养皿中。 3. 在操作台中静置1-2小时,让琼脂糖凝固。 4. 用3M微孔胶带封住培养皿。 5. 在4°C条件下冷处理4天。 6. 将培养皿置于光照条件下培养。 培养基配方(1/2 MS10): 1. MS Macro I 50.0 ml 2. MS Macro II 50.0 ml 3. Myo 10.0 ml 4. FeNaEDTA 10.0 ml 5. MS Vitamines 1.0 ml 6. MS Micronutrients 0.5 ml 7. 蔗糖 10.0 g 8. 加水至1000.0 ml 用1 M KOH调整pH至5.7,也可使用MES(0.5g/l)以保持更稳定的pH。 (责任编辑:泉水) |