七、近交系大、小鼠遗传质量检测标准

　　（一）管理制度

　　1.引种来源清楚，应带有谱系及特性资料（如近交代数、交配方式、遗传组成、生物学特性），并应符合国际公认的遗传概貌标准。

　　2.按国际规定的近交系动物的繁殖系统，进行种群维持和生产。

　　（1）基础群和血缘扩大群：

　　应以同胞兄妹交配方法进行。基础群的维持一定按着近交系的保种方法进行，并应具有谱系及个体卡片记录。

　　（2）生产群：

　　以随机交配方法（或红绿灯方法）进行生产。可连续繁殖3-5代，其生产群种鼠应与基础群血缘关系保持相对平行。

　　（二）遗传质量检查

　　1.方法的选择：

　　（1）异体皮肤移殖法：无论是大鼠，还是小鼠异体皮肤移植的方法，一直是鉴定近交品系的经典方法，由于该方法既经济，又权威，为首选方法。

　　（2）生化电泳方法：是近些年来利用同功酶和蛋白质的多态性对近交系动物进行遗传监测的一种常规方法。由于其快速、准确、灵敏，在检出亚系动物时，比起皮肤移殖法，有其独特之处，可作为近交系小鼠遗传质量检查的又一重要方法。

　　2.位点的选择：

　　近交系动物遗传品质的变异，主要有三方面的因素：

　　（1）遗传污染；

　　（2）遗传漂变；

　　（3）遗传突变。

　　在这三方面中遗传污染危害最大，而另两方面，在一定时间内发生改变的频率很低。因此，在位点选择上，根据北京市现在常用的10种近交系小鼠，选择了位于7个染色体上八个差异性位点，作为检查的第一线位点。如果任何一种品系发生过遗传污染，这八个位点中某些位点将会出现杂合或者变异。考虑到位点的选择尽量分布在多个染色体上，我们又选择了位于5个染色体上的五个比较容易操作，耗资较少的位点作为第二线位点的检查。原则上，第一线位点的检查如果发现了问题，将不再进行第二线位点的检查。

　　第一线位点：

　　Hbb,Car-2,Gpd,ES-1,ES-3,Trf,Gp1,ldh-1。

　　第二线位点：

　　Mup,Pgm-1,ES-10,Sep-1,Ce-2。

　　3.动物的选择：

　　近交系大、小鼠每个品系至少进行四只动物的异体皮肤移植。近交系小鼠皮肤移植成功者还需从核心群中选送四只动物（2♀，2♂年龄不限）进行生化位点的检查。皮肤移植失败者，则不考虑进行生化位点的检查。

　　4.结果的判断：

　　将检测报告汇总，由专家小组作出结论。

　　见附表五：差异性位点的选择和10种近交系小鼠的遗传概貌。

表五

Chromosome Locus/Strain 7 3 4 8 11 9 7 1 Hbb Car-2 Gpd ES-1 ES-3 Trf Gpi Ldh-1 615 S a b b O b a a TA1 S b b a a b a Ta2 d a b b c b b a T739 S b b b O b a a BALA/C d b b b a b a a C57BL/O S a a a a b b a CBA/N d a b b c a b b C3H/He d b b b c b b a DBA/2 d b b b c b a b KK S a a b c b b a

　　八、实验动物饲料的要求

　　供给营养适宜的饮料是保证实验动物正常生长、发育、繁殖以及各种外界因素的反应保持相对恒定，增强体质的重要条件。特要求如下：

　　（一）适宜的营养成分

　　见表。

实验动物饲料的各种营养供给参考标准

动物种类/营养成分 大鼠、小鼠、地鼠 家兔、豚鼠 蛋白质克% 20-25 18-20 脂肪克% 5-10 4-8 钙克% 0.9-1.2 1.2-1.5 磷克% 0.6-0.8 0.8-1.0 赖氨酸克% 8-10 7-9 蛋氨酸克% 4-6 4-6 维生素A I·U/100克 1500 1500 维生素D I·U/100克 200 200 维生素C mg/100 克 0 60-80

　　考虑到原粮中维生素E含量已够，故表中不再例入。特殊的实验需要可加入5-10mg/100g。

　　注：除以上主要营养成分，还必需有适宜量的维生素、微量元素及纤维素等营养成分。

　　（二）科学设计各种实验动物饲料配方

　　1.各种实验动物的饮料配方，应根据其不同需要量科学设计。

　　2.应根据不同实验动物的特异需要，适当添加蛋白质、维生素C及纤维素等。

　　3.确定后的饮料配方不得任意更改，力求稳定。

　　4.饲料中不得添加抗菌剂、抗虫剂、防腐防霉剂及激素等其它药物。

　　5.不得用非标准饲料，饲养实验动物。

　　（三）原料要求及保管

　　1.精选新鲜、无杂质、无毒、无污染、无霉变、无虫蛀鼠咬的各种原料。

　　2.应设专门饲料库房：

　　饲料库房应保持干燥、通风、无虫、无野鼠，经常保持清洁卫生，各种饲料或原料应分类堆放整洁。

　　3.维生素类原料应存放在避光、低温、干燥处。

　　4.加工后成品与原料应分开保管。

　　5.饲料库房内严禁存放杂品及毒性药品等。

　　6.饲料库必须严格领发、保管制度及完善管理手续。

　　（四）加工制作

　　选择优质原料按饲料配方比，准确称重，充分混匀。植物油、维生素及无机盐类先与少量粉料混匀再与大量粉料充分混匀后加工。制成的料块应有适宜的硬度及适品性。

　　料块成品装入无毒清洁饲料桶或清洁牛皮纸袋内，封口贴有或挂有注明饲料种类、制作日期及制作人的标签，成品料块存放不得超过两个月。

　　（五）定期检测分析营养成分

　　各种饮料成品应每半年抽样检测单位，分析营养成分一次。特殊情况必要时随时抽样检测分析。

　　九、实验动物检疫要求

　　为了预防实验动物群体中发生传染病。避免新引起的动物对原有动物及有关人员造成危害，提高实验动物的健康水平，特规定如下：
1.新引起的动物必须隔离，确认无病之后，方可移入饲养区。 2.不从疫区引起动物。3.动物发生传染病死亡应及时进行处理（病理尸检或实验室检查）作出诊断，提出处理意见，报请有关负责人及主管部门。 4.有病的动物不准做动物实验，发生传染病时，原则上全部销毁。房屋、用具、笼具架、垫料、衣服、鞋帽等必须进行彻底消毒，动物室封锁一定时间后才能开放。 5.实验动物发生烈性传染病流行时，应立即报告北京医学实验动物管理委员会，同时采取严格的隔离措施，以兔传染病蔓延。如有拖延或隐瞒不报者，所在单位要承担责任，并吊销其合格证。 6.野生动物的检疫，应由使用单位就地进行，在确认无人畜共患病及动物传染病之后方可使用。