第七节　计划生育研究中实验动物的选择和应用

　　一、常用实验动物的生殖功能、结构特点

　　实行计划生育是我国的一项基本国策。到本世纪末，力争把我国人中控制在12亿以内，此项任务十分艰巨。如果人口控制不住，就会影响经济振兴，影响现代化，甚至影响社会的安定。广大人民群众迫切需要更多、更安全的、使用方便的节育措施。为了寻找更多的有效措施来控制人类的生育，保证避孕药物或其他节育措施的有效和安全，必须首先在实验动物身上进行实验研究。因此，保证实验动物的质量和了解实验动物生殖和发育等特点，是十分重要。

　　（一）常用实验动物的繁殖周期特点

　　计划生育研究中常用的实验动物有小鼠、大鼠、豚鼠、兔狗、恒河猴等，各种动物的性周期、排卵时间及妊娠期都各不相同。如狗是季节性单发情，猫季节性多次发情，而鼠、豚鼠全年都有动情周期的循环，灵长类有月经周期，但只有一定季节才排卵（见下页表10-37）

　　（二）常用实验动物排卵和性周期特点

　　哺乳动物的排卵可分为两种类型，一般动物是按一定的周期进行排卵的，这类动物不交配也可正常排卵，此称为自发排卵或非刺激性排卵；而兔子、猫、雪貂（白鼬）、水貂等，只有经过交配的刺激才能进行排卵，此称为诱发排卵，也称刺激性排卵或反射性排卵。例如兔子的卵巢几乎连续不断地产生卵子，但成熟的卵泡只有经过雄兔交配后才能排卵。这是因为雌兔受到雄兔爬跨时，垂体受到兴奋而引起的刺激，这种刺激出现在交配后1小时，此时垂体释放排卵素（黄体生物素），在促排卵素的影响下大约在交配后10～12小时发生排卵。如果没有交配刺激，成熟的卵泡自行退化，经10～16小时逐渐被吸收，而新的卵泡又开始成熟。

　　雌性哺乳动物的性周期可分为三型

　　第一型包括狗、马、牛以及其他哺乳动物的性周期。该型性周期又可分为前半期和后半期。前半期由雌激素所控制，雌激素的效果逐渐变强，至发情期达到最高程度。这个时期，卵巢内卵泡成熟，随后便引起排卵，随着排卵，雌激素的作用逐渐减弱，以后即转入以孕激素所控制的后半期。如果没有妊娠，黄体退化，则又转为由雌激素所控制的新的性周期。总之，在这一性周期中，雌激素作用的期间和孕激素作用的期间是相继出现的，在两期之间排卵。第一型是基本型。

　　第二型包括小白鼠、大白鼠、田鼠类、土拔鼠和沙鼠的性周期。这类动物在发情期排卵，也形成黄体，但生成的黄体不能分泌孕激素并立即退化，即没有第一型的后半期，所以性周期是短的。如果妊娠了，黄体继续存在，称为妊娠黄体，能分泌黄体酮。

　　第三型包括兔子、猫等的性周期，这类动物如果不交配就不引起排卵，也不形成黄体，成熟的卵泡逐渐退化消失，随后又有新的卵泡成熟，并不断反复进行更新，这种情况下的性周期约为15～16天（成熟卵泡的寿命为13天，卵泡退化约1～2天）；如果进行交配，则引起排卵，产生黄体，分泌孕激素；若没有受精，则所形成的假妊娠黄体约经20天退化。

表10-37　实验动物繁殖周期

动物

种类

第一次交

配年龄

发情周期（天）

发情

持续期

排卵

时间

受精卵进入子宫时间

植入开

始时间

妊娠期

狗

1（1/2）～2岁雄狗2岁

发情期间隔4～8个月，春秋以品种不同而不同

9（4～13）天

发情第3或4天

交配后5～6天

交配后15天

60天（58～63）

猫

6～8月龄

季节性强，春秋季节多次发情15～28

4（3～10）天

诱发排卵，交配后27小时

排卵后4天

交配后13天

63天（52～69）

兔

4～5月龄

多次发情

时间界限不明显

诱发排卵，交配后10.5小时

交配后4天

交配后7～8天

32天（29～36）

大白鼠

8～10月龄

4.5(4～5)

14小时

发情开始后10小时

交配后3～4天

交配后5～6天

22天（19～23）

小白鼠

6～8月龄

5（4～7）

6～24小时

发情开始后2～3小时

交配后3～4天

交配后4～5天

19-21天

豚鼠

雄性6月龄雌性5月龄

16.5(12～18)

8小时

发情开始后10小时

交配后3～4天

交配后5～7天

70天（69～75）

恒河猴

第3～5次性周期后才可进行交配

月经周期28（23～33）

时间界限不明显一般为4～6小时

月经周期9～20天接近发情结束时

交配后4天

交配后9天

164天（156～180）

　　实验动物性季节（繁殖季节）差异较大，兔、小白鼠、大白鼠、猪等一年四季都有性的活动（妊娠时除外），这类动物称为“常年多次发情（或常年发情动物）”，其繁殖力很强。狗的发情有一定的季节性，雌狗一年内发情两次，多在春秋两季，每次发情持续14～21天，每次发情的间隔期约7个月。猫的繁殖季节，北半球是3～8月分，南半球是9月到次年的2月份。欧洲田鼠的繁殖季节是4～8月份。羊的繁殖季节在秋季（7～10月份），羊也是“季节性多次发情”。

　　实验动物性周期一般分为四期：发情前期，发情期、发情后期和发情间期（休情期）。有的还将发情后期分为二期（后情一期和二期）。

　　小鼠动情周期一般分为五期（其中动情后分为二期），约120～144小时。大鼠动情周期为96～120小时。

　　哺乳类雌性动物在性成熟后出现动情周期变化，其中啮齿类动物在动情周期不同阶段，阴道粘膜发生比较典型的变化。因次，根据阴道涂片法的细胞学改变，可以推断卵巢功能的周期变化。方法是用圆头滴管吸少许生理盐不滴入阴道口，轻轻冲吸一点阴道液体作涂片，待涂片干燥后，用10%福尔马林或95%酒精固定，经苏木精一伊红染色后作镜检（表10-38）。

表10-38　动情周期阴道涂片的细胞变化特点

阶　　段

经过时间（小时）

卵巢变化

细　胞　变　化　特　点

小鼠

大鼠

动情前期（P）(Proestrus Stage)

10

17～21

卵泡加速生长 全部是有核上皮细胞，偶有少量角化细胞

动情期（E）（Estrus Stage）

42

9～15

卵胞成熟排卵 全部是无核角化细胞或间有少量上皮细胞

动情后期（M）（Metestrus Stage）

12

10～14

黄体生成 白细胞、角化细胞、有核上皮细胞均有

动情间期（DI）(Diestrus Stage)

48～72

60～70

黄体退化 大量白细胞及少量上皮细胞和粘膜

　　（三）常用实验动物精子和卵子的运输特点

　　1．精子的运输哺乳动物精子从阴道到输卵管是很快的。马、猪和大鼠在交配后很短时间，子宫腔内就看到了精子。这些动物由于在交配时宫颈口舒张，所以精子直接射到子宫腔内。兔精子进入子大约需要1～3小时。

　　精子获能是一个生理过程，即精子获得穿透新排出卵的透明带的能力。这个过程对一些动物的受精作用是必需的。兔精子获能需要6小时，大鼠2～3小时，羊约1.5小时，雪貂大约3.5小时。实验证明兔、大鼠、小鼠、地鼠、羊和雪貂精子的获能是必需的。

　　哺乳动物精子在进入雌性生殖道以后，对卵的受精能力局限于很短一段时间。各种动物在雌性生殖道内有生育能力的时间有很大变化（表10-39）。

表10-39　精子在雌性生殖道内的生育力和活动力的时间

实验动物

生育力最长时间（小时）

活动力最长时间（小时）

小　　鼠

6

13

大　　鼠

14

17

豚　　鼠

21～22

41

兔

30～32

-

雪　　貂

36～48;126

-

牛

28～50

96

羊

30～48

48

马

144

144

蝙　　蝠

135天

159天

　　在整个动情期，小白鼠子宫为液体充满而扩张，子宫壁产生蠕动，可以推动精子随液体进入输卵管，在输卵管内，精子移动较慢，约在交配后15分钟到1小时之内，始能到达输卵管壶腹部。精子在输卵管内保持受精力不超过6小时，但活动力可长达13.5小时。精子要经过在子宫或输卵管中液体的处理后才能获得受精能力。

　　2．卵的运输当卵泡破裂时，有一部分卵泡液随之流出，卵被排到围卵巢腔内，所以不发生漏到腹腔内的现象。当动情期时，围卵腔变大并产生一种液体，能把卵带到输卵管伞部，加之漏斗部的绒毛活动和输卵管的收缩帮助卵运输到输卵管下段。

　　卵子的大小并不取决于动物的个体，而几乎完全取决于所积累的卵黄含量的多少。各种常用实验动物的卵子直径（μm）如下：