一种不携带电荷的辅酶A前体，能够进入到细胞内部。研究者利用这一特性，对活细胞内部的蛋白质成功进行了特异性位点的共价标记。

活细胞成像技术为科学家们提供了一扇观察细胞内部活动的“窗口”。然而，这项技术的实现需要比传统荧光蛋白融合和抗体结合物方法更为特异和高效的共价标记技术。尽管传统技术在某些方面表现良好，但由于荧光蛋白标签体积较大，以及抗体的膜通透性较差，这些方法在活细胞内的应用受到限制。

为了解决这些问题，美国加州大学圣迭戈分校的Michael Burkart教授及其团队开发了一种创新方法。他们利用天然的酰基转移酶，将携带缩氨酸的载体蛋白与包含介导分子的辅酶A（CoA）类似物进行融合，实现了共价标记。Burkart教授解释道：“如果你能够通过某种方式将CoA类似物引入细胞内，生物体将会利用这些类似物对载体蛋白进行融合标记，因为大部分的酰基转移酶能够识别并处理CoA分子。”

研究团队发现，不带电荷的CoA前体是泛酰巯基乙胺。当他们将一个荧光标记的泛酰巯基乙胺类似物添加到表达载体蛋白融合和酰基转移酶的大肠杆菌细胞中时，融合蛋白成功被标记。整个过程包括以下几个步骤：首先，泛酰巯基乙胺类似物被激活；然后，通过特定的CoA生物合成途径将其转化为CoA类似物；最后，CoA类似物通过酰基转移酶的作用转移到载体蛋白上。

这一研究成果已发表在《美国化学会期刊》上。研究团队优化了合成程序，并对包含荧光介导分子和生物性正交标签的泛酰巯基乙胺类似物进行了分析。与传统抗体检测技术相比，这种方法在检测和分离方面表现出更广泛的适用性。研究表明，这些泛酰巯基乙胺类似物能够高效地转化为CoA类似物，并成功连接到载体蛋白上。Burkart教授表示：“这一方法的美妙之处在于，只要能够获取某种CoA类似物，就可以将其连接到融合蛋白上。这为研究细胞内部的蛋白质功能提供了强大的工具。”

值得一提的是，Burkart团队首次实现了利用细胞内分子对活体载体蛋白的标记。尽管其他研究团队也曾尝试使用CoA相关方法标记细胞表面蛋白，但由于这些方法无法将CoA类似物引入细胞内部，其应用范围局限于膜蛋白的修饰。而Burkart团队的技术不仅突破了这一限制，还计划将其应用扩展到其他物种中，并尝试在天然蛋白中进行标记，而不仅限于载体蛋白融合和酰基转移酶的过度表达。

目前，Burkart研究小组正在进一步优化和开发他们的CoA引导技术。Burkart表示：“令人兴奋的是，其他研究者现在可以将他们的蛋白融合物与我们的CoA运载技术结合，研究细胞内部的蛋白质功能。这将有助于我们更好地理解细胞环境下蛋白质的动态变化。”

参考文献：
Burkart M. et al., Journal of the American Chemical Society.
原文来源：Nature Methods