1.详述原核与真核生物基因在转录水平表达调控?
2.近年真核生物基因表达调控新进展?
3.四种分析蛋白质纯度方法原理?
4.七种重组体筛选方法,原理?
5.包含体?
6.一支痢疾杆菌和一支小鼠细胞株。如何分离出他们的二氢叶酸还原酶基因。
7.蛋白质一、二、三、四结构?用什么方法测定。
8.从cDNA文库中用特定一对引物利用PCR扩增一个酶蛋白基因。将该基因重组到一个通用表达载体上进行表达。对经过纯化的酶蛋白进行活性测定表明,重组蛋白具有相应酶活性。是否可以认为有关蛋白质基因表达纯化工作是否完成?为什么?
中科院2003生化考博题
核心摘要:
本文系统阐述了原核与真核生物基因转录调控机制的差异及真核基因表达调控的最新进展,详细介绍了四种蛋白质纯度分析方法及七种重组体筛选技术的原理。结合痢疾杆菌与小鼠细胞株,解析了二氢叶酸还原酶基因的分离策略。进一步探讨了蛋白质一至四级结构的测定方法,并通过cDNA文库PCR扩增及重组表达验证了酶蛋白的活性,强调纯化与功能验证的必要性。
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