常用缓冲溶液的配制方法
缓冲溶液在生物医学实验中具有重要作用,能够维持体系的pH稳定,保障实验结果的可靠性。以下介绍两种常用缓冲溶液的配制方法及其科学原理。
一、甘氨酸-盐酸缓冲液(0.05 mol/L)
甘氨酸-盐酸缓冲液适用于低pH环境下的实验。其配制方法如下:
X毫升0.2 mol/L甘氨酸溶液与Y毫升0.2 mol/L盐酸溶液混合后,加水稀释至200毫升。根据所需pH值,调整X和Y的比例。
| pH | X(甘氨酸,ml) | Y(盐酸,ml) |
| 2.0 | 50 | 44.0 |
| 2.4 | 50 | 32.4 |
| 2.6 | 50 | 24.2 |
| 2.8 | 50 | 16.8 |
| 3.0 | 50 | 11.4 |
| 3.2 | 50 | 8.2 |
| 3.4 | 50 | 6.4 |
| 3.6 | 50 | 5.0 |
甘氨酸分子量为75.07,0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升。
二、邻苯二甲酸-盐酸缓冲液(0.05 mol/L)
邻苯二甲酸-盐酸缓冲液适用于更低pH范围的实验。配制方法如下:
X毫升0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾溶液与Y毫升0.2 mol/L盐酸溶液混合后,加水稀释至20毫升。根据所需pH值,调整X和Y的比例。
| pH(20℃) | X(邻苯二甲酸氢钾,ml) | Y(盐酸,ml) |
| 2.2 | 5 | 4.070 |
| 2.4 | 5 | 3.960 |
| 2.6 | 5 | 3.295 |
| 2.8 | 5 | 2.642 |
| 3.0 | 5 | 2.022 |
缓冲液机制说明:
缓冲溶液由弱酸及其共轭碱组成,能够抵抗外来酸或碱的加入所引起的pH变化。甘氨酸和邻苯二甲酸体系分别适用于不同的pH区间,实验者可根据具体需求选择。
参考文献:
1. Lehninger Principles of Biochemistry, 7th Edition.
2. 国家标准GB/T 6682-2008《分析实验室用水规格及试验方法》。