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  • [分子生物学] PCR污染与对策 日期:2005-04-06 00:09:19 点击:1168 好评:0

    PCR污染与对策 PCR反应的最大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性,但令人头痛的问题是易污染,极其微量的污染即可造成假阳性的产生. 污染原因 (一)标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染,或标本放置时,由于密封不严溢于容器外,或容器外粘...

  • [分子生物学] PCR反应体系与反应条件 日期:2005-04-06 00:08:44 点击:5134 好评:2

    PCR反应体系与反应条件 -------------------------------------------------------------------------------- 标准的PCR反应体系: 10×扩增缓冲液 10ul 4种dNTP混合物 各200umol/L 引物 各10~100pmol 模板DNA 0.1~2ug Taq DNA聚合酶 2.5u Mg2+ 1.5mmol/L...

  • [分子生物学] PCR常见问题总汇 日期:2005-04-06 00:07:07 点击:1536 好评:0

    PCR常见问题总汇 PCR产物的电泳检测时间 一般为48h以内,有些最好于当日电泳检测,大于48h后带型不规则甚致消失。 假阴性,不出现扩增条带 PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备,②引物的质量与特异性,③酶的质量及, ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述...

  • [分子生物学] RNA酶活性的控制 日期:2005-04-05 21:58:00 点击:1053 好评:0

    RNA酶活性的控制 为了获得高质量的真核细胞mRNA, 必须使用RNA酶的抑制剂或采用下述的破碎细胞和灭活RNA酶同步进行的方法,最大限度地降低细胞破碎过程中所释放的RNA酶的活性。同时,避免偶然引入实验室内其他潜在的痕量RNA酶也很重要。下面列举避免RNA酶法...

  • [分子生物学] 分子生物学实验基础知识 日期:2005-04-05 21:55:47 点击:3059 好评:2

    分子生物学实验基础知识 分子生物学是在生物化学基础上发展起来的,以研究核酸和蛋白质结构、功能等生命本质的学科,在核酸、蛋白质分子水平研究发...

  • [分子生物学] 原位杂交操作规程 日期:2005-01-06 12:11:45 点击:1470 好评:0

    原位杂交操作规程 (一)、仪器设备 医用微波炉; 水浴锅。 (二)、试剂 0.2mol/L HCl : HCl 8.2ml , H20 定容 0.5L 。 0.1mol/L 三乙醇胺 (pH8.0): 三乙醇胺 5.33ml , H20 定容 0.4L 。 .5ml/L 醋酸 -2.5ml/L 醋酸酐 : 三乙醇胺 13.2ml , NaCl 5g ,浓...

  • [分子生物学] 荧光原位杂交(FISH)和用引物介导的原位标记(PRINS)操作规程 日期:2005-01-06 12:11:27 点击:1432 好评:0

    荧光原位杂交(FISH)和用引物介导的原位标记(PRINS)操作规程 仪器设备 1 、 医用微波炉; 2 、 水浴锅; 3 、 OLYMPUS BX51 荧光显微镜; 4 、 OLYMPUS DP11 数字显微照相机。 FISH 试剂 ( 1 ) 1×PBS :由 10×PBS 溶液稀释而成,储存于 4 ℃; ( 2...

  • [分子生物学] 原位杂交 日期:2005-01-06 12:11:09 点击:3629 好评:-2

    原位杂交组织(或细胞)化学 (In situ Hybridization Histochemistry, ISHH) 简称原位杂交(In Situ Hybridization),属于固相分子杂交的范畴,它是用标记的DNA或RNA为探针,在原位检测组织细胞内特定核酸序列的方法。根据所用探针和靶核酸的不同,原位杂交可分...

  • [分子生物学] 核糖核酸干扰技术 日期:2004-08-26 16:39:27 点击:979 好评:0

    核糖核酸干扰技术 转录后基因沉默(PTGS, post- transcriptional gene silencing)-最初被认为仅限于矮牵牛花和其它一些植物中的奇异现象,是目前分子生物学研究中一个最热门的话题。过去几年中,科研工作者已明确转录后基因沉默现象普遍存在于动、植物中,...

  • [分子生物学] SOUTHERN BLOTS 日期:2004-02-12 00:00:00 点击:801 好评:0

    SOUTHERN BLOTS 1. RESTRICTION: Use 5mg genomic DNA for Southern hybridization. Aliquot DNA in H20: Total Vol 100l . Add 100l Mix. TOTAL VOL: 200l MIX: Add 100 units per sample of each restriction enzyme. Add appropriate buffer (10X)--20l f...

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