M0：M0白血病细胞的FS和SS都很低，在SSνCD45直方图中处于原始淋巴细胞区域。M0的白血病细胞至少表达一个髓系特异性标记如MPO、CD13、CD116，MPO较CD13、CD116更敏感；一般淋巴系标记是阴性的，但可能表达CD7或CD4；一般CD34、HLA-DR阳性。有研究显示AML复合表达CD7和CD34预后不良。
M1：M1的白血病细胞抗原表达类似于M0并与M0不好区分，M1一般表达CD13，CD33和HLA-DR，CD34表达较M0少，部分可能表达CD15，较少病人可能表达CD4。
M2：M2与M1的主要区别是分化成熟增加，原始细胞减少；CD34表达较M1少，CD15表达较M1增加，大部分病例HLA-DR阳性，CD13表达强于CD33；部分M2表达CD19和CD56伴有t(8;21)，罕见的伴有t(8;21)的M2不表达CD13，CD33和CD14但MPO阳性。
M3：M3白血病细胞由于它的高颗粒性而SS增大；M3的白血病细胞一般表达CD13，CD33，部分病人可能表达CD2，但HLA-DR阴性，CD34一般为阴性，复发病人阳性；部分病人可能表达CD56，表达CD56者应作基因检查(APL/RARα)以排外髓/NK细胞急性白血病(详见后)。
M4、M5：M4、M5的免疫表型相似，重要表型特点是表达CD13、CD33、CD14、CD15和HLA-DR，部分病人表达CD4、CD7,部分病人可能表达CD56，表达CD2多为M4E0，常伴有16号染色体异常，预后好。
M6：M6较少见，一般表达HLA-DR、CD34、CD13、CD33，GPA对确定红系有用。
M7：M7占成人ANLL的1%、儿童的4%。成人M7多见于二次性白血病,即CML.BC或MDS-RAEB或MF白血病变。而儿童M7多为原发。M7免疫学表型一般为:CD41+,CD42+,CD61+,CD33+/-,CD13+/-,CD34+,DR+/-,CD10-。特异性标记CD41、CD42、CD61阳性可确诊M7，但要注意排外血小板粘附于细胞上的假阳性结果。
3．急性未分化白血病  用流式细胞仪分析仅有大约1%的急性白血病不能分类，典型急性未分化白血病仅有HLA-DR和CD34表达而无系列特异性抗原表达。
4．杂合型白血病   真正的双系列表型白血病是伴有t(9;22)或有11q23 MLL（myeloid/lymphoid or mixed lineage leukemia髓/淋系或混合性白血病）基因重排的病人，以往报道的许多杂合型白血病多是由于方法学问题不能排除非白血病细胞的干扰，或将非特异弱表达当作特异表达，如前所述白血病细胞毕竟不是正常造血细胞,其抗原表达与正常造血细胞并不完全相同，部分丧失了系列专一性和分化的严格性，因此不要轻易定型杂合型白血病，国际上杂合型白血病尚无统一诊断标准。
5．慢性粒细胞白血病急性变(CML BC)   慢性粒细胞白血病(慢粒 CML)是一种多能造血干细胞疾病,其转归多为急性变。慢粒急变(CML BC)涉及所有造血细胞系列,往往不易从形态学上确定急变类型, 50%-60%为AML变,30%左右为ALL变。AML变可表达AML的所有表型，大多数ALL变为B细胞来源,其中cALL及前B-ALL多见,罕见T-ALL变。  
6．B 淋巴系细胞增殖性疾病   B 淋巴系细胞增殖性疾病的免疫学分型见表12.6。

T淋巴系细胞增殖性疾病中包括T幼淋细胞白血病（T -PLL）、NK细胞白血病（T-LGL、NK-LGL）和成人T淋巴细胞白血病（ATL）、T慢性淋巴细胞白血病(T-CLL)。
T-PLL ：T-PLL的白血病细胞一般表达CD2、CD3、CD5和CD7，大多数病人CD4+ CD8-,但偶有CD4+ CD8+,单独表达CD8者少见, 本病常伴有14q11和14q32改变, 有CD4+ CD8-表型者预后较好,本病较B-PLL恶性度高。
NK 细胞白血病 ：NK系列白血病最早描述的是大颗粒淋巴细胞白血病（LGL）, LGL有两种类型：T-LGL和NK-LGL，T-LGL表达CD3、CD8、CD2、CD16、CD11b、CD57、而CD56、CD5、CD7、CD4和CD25多阴性，有TCR基因重排。NK-LGL表达CD2、CD16和CD56，而CD3、CD4多阴性，CD8、和CD57弱表达或阴性，无TCRα-β基因重排。最近NK系列白血病又有新的亚型发现，如急性前髓系/NK 细胞白血病、急性髓系/NK 细胞白血病、原始NK 细胞白血病、NK样T细胞白血病。急性前髓系/NK 细胞白血病是一种最近认识的不同类型的白血病, 其特点是有明显髓外涉及,不成熟的原始淋巴细胞样形态,伴MPO--、CD7+、 CD33+/CD13+、sCD3-、cCD3-、CD56+,预后不良。急性髓系/NK 细胞白血病，形态学和免疫表型类似于M3,但无RARα基因重排，一般HLA-DR-、CD33+、CD13+、CD56+，多见于老年病人，对维甲酸无反应。原始NK 细胞白血病，无髓系和淋巴系抗原，CD56+、cCD3+/-、CD2+/-、CD4+/-、CD7+/-，少数有TCRβ基因重排，而无TCRγ-δ基因重排。NK细胞系列白血病的新亚型是近10年才较多注意到的白血病,其临床特点,免疫表型,染色体及基因改变需进一步积累病例研究才能彻底明了。大约10%-20%左右的急性白血病表达CD56，除了原始NK 细胞白血病、NK样T细胞白血病、急性髓系/NK 细胞白血病、急性前髓系/NK 细胞白血病外，大部分表达CD56的急性白血病是FAB分类的M2、M3、M4、M5型，这类病人究竟是急性髓系/NK 细胞白血病还是急性髓系细胞白血病伴NK抗原表达有待进一步研究，鉴于急性白血病部分丧失了系列专一性和分化的严格性，可能称为急性髓系细胞白血病伴NK细胞抗原表达较为合适。
成人T淋巴细胞白血病(ATL)：大多数ATL细胞表达激活T细胞表型：CD3、CD4、CD5、CD25、HLA-DR、TCR，一般CD7-和CD8-,常有粘附分子L-选择素的异常表达； 伴有p53异常者预后不良。
T-CLL：T-CLL少于CLL总数的1%，细胞形态学类似与一般CLL，但临床发展较快，但多数病人表达CD2、CD3、CD5、CD7、CD4、少数病人表达CD8。

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十三.流式细胞术在血液学中的应用    淋巴瘤免疫分型

       目前淋巴瘤的分类方法已从LSG的形态学分类逐渐转变为REAL分类法, REAL分类法是以肿瘤发生源为基础的分类方法,在原来的形态学基础上加上免疫学分型后再加以分类,这种分类方法不仅能够推断肿瘤的发生源,对治疗也有指导意义。因此淋巴瘤的免疫分型越来越重要。如同白血病免疫分型一样，淋巴瘤的免疫分型也是利用单克隆抗体检测淋巴瘤细胞的细胞膜和细胞浆抗原,分析其表现型,以了解被测淋巴瘤细胞所属细胞系列及其分化程度。流式细胞仪能对多数的淋巴瘤细胞的细胞膜和细胞浆抗原迅速客观地做出检测，在淋巴瘤的免疫分型中起着不可替代的作用。
临床淋巴瘤的免疫分型的检测标本一般是淋巴结、脾脏、胸水、腹水等。在临床淋巴瘤的免疫分型工作中常可遇到以下四种情况：①B细胞系淋巴瘤②T/NK细胞系淋巴瘤③淋巴细胞系以外的造血细胞肿瘤④造血细胞以外的肿瘤。
REAL分类淋巴瘤的免疫表型见表12.8。

*：弱表达或阴性。
BLBL :前B原始淋巴细胞淋巴瘤/白血病; BSLL: B-小淋巴细胞淋巴瘤; LPL:淋巴浆细胞样淋巴瘤; MCL: 斗篷细胞淋巴瘤; FCL:滤泡中心淋巴瘤; MZL: 边缘带B细胞淋巴瘤; SMZL :脾MZL ;HCL:毛细胞白血病; PC:浆细胞瘤;DLBL: B-弥漫性大细胞淋巴瘤; BL: Burkitts淋巴瘤; HBLB:高度B细胞淋巴瘤, Burkitts样; TLB L: 前T原始淋巴细胞淋巴瘤/白血病; TPLL: T幼淋细胞白血病; LGLT:大颗粒淋巴细胞白血病, T细胞型; LGLNK: 大颗粒淋巴细胞白血病, NK细胞型; MF:覃样真菌病; PTL:外周T细胞淋巴瘤,非特异;AILD:血管免疫T细胞淋巴瘤;ACL:血管中心性淋巴瘤;  ITCL:肠T细胞淋巴瘤; ATL:成人T细胞淋巴瘤/白血病; LCL:大细胞淋巴瘤; LCLH: 大细胞淋巴瘤,何杰金氏样;
1．%20B细胞系淋巴瘤    大多数情况下, B细胞系淋巴瘤CD19、CD20阳性，分化早期CD20阴性，CD10、CD34阳性；分化晚期CD5、CD23阳性，成熟为浆细胞后以上标记均阴性。利用单克隆抗体κ、λ（正常时κ：λ=2：1）可检测免疫球蛋白轻链的偏移，推断是否克隆性增殖免疫球蛋白。表12.6. 列出了外周B 淋巴系淋巴瘤的4种类型的免疫分型。
SLL(small cell lymphocyte lymphoma)--小细胞淋巴细胞淋巴瘤: 小细胞淋巴细胞淋巴瘤细胞一般表达CD19、CD20、CD43和CD79，CD5与以上抗原复合表达，sIgM、sIgD、CD11c和CD25也常表达但表达较弱，CD10、CD22阴性。伴染色体异常者预后较差。
MCL（mantle cell lymphoma）--斗篷细胞淋巴瘤：MCL包括以前分类为中等淋巴细胞淋巴瘤（ILL）、中度分化淋巴细胞淋巴瘤(IDL)、中心细胞淋巴瘤和套区细胞淋巴瘤（MZL）,占淋巴瘤的2%-8%，λ型较κ型常见， sIgM中度表达,IgD弱或阴性，表达CD19、CD20、CD22、CD43，但多数病例CD5阳性CD23阴性，CD10一般阴性，CD5阳性CD23阴性和Ig类型可帮助鉴别MCL和FCL。
FCL（Follicular center cell lymphoma）---泸泡中心细胞淋巴瘤：FCL占淋巴瘤的45%，表达CD19、CD20、CD22， sIg强表达,但多数病例CD10和CD23阳性，典型FCCL CD5、CD43和CD11c阴性。CD10阳性、CD11c阴性和sIg强表达利于与MZL鉴别。
MZL（Marginal zone lymphoma）--边缘带淋巴瘤和相关B 细胞淋巴瘤：典型免疫表型: CD19、CD20、CD22、HLA-DR阳性，sIg中度表达，CD5、CD10、CD23、CD25阴性，CD21、CD24多数情况下阴性，多数表达CD11c。CD5、CD10、CD23、CD25阴性，CD21、CD24多数情况下阴性，利于与CLL/SLL、FCCL、MZL鉴别。
2． T/NK细胞系淋巴瘤   早期T细胞一般CD2、CD5、CD7、cCD3阳性。T/NK细胞系淋巴瘤的详细分类及表型参见表12.8。细胞膜CD3阳性可确认为外周T细胞肿瘤, 外周T细胞肿瘤的特征是CD3与CD4或CD8复合表达，并常有克隆性T细胞受体，或α-β型或γ-δ型；
MF（mycosis fungoides）--蕈样真菌病和sezary综合症:占皮肤淋巴瘤的绝大多数，CD4阳性，同时表达CD2、CD3、CD5，有时CD7阴性，CD8阳性病例极少见但已有报道，有无TCRβ基因重排对鉴别淋巴瘤和炎性反应有帮助。
LCL（large cell lymphoma）--大细胞淋巴瘤: 大细胞淋巴瘤（LCL）占成人淋巴瘤的40%，儿童的1/3，成人80%是B细胞型的，儿童B细胞型和T细胞型各占一半。
3． 淋巴细胞系以外的造血细胞肿瘤  急性髓系细胞白血病（特别是M4、M5）淋巴结转移时有发生，如T、B淋巴细胞标记低表达应怀疑并按白血病免疫分型处理。
4． 造血细胞以外的肿瘤  检测淋巴结、胸腹水标本时如遇CD45阴性情况应考虑非造血系统肿瘤淋巴结、胸膜、腹膜转移。 (责任编辑：泉水)