二十. 流式细胞术在血液学中的应用 细胞凋亡研究 细胞凋亡是细胞在基因控制下的有序死亡,在疾病发生、发展中有重要作用,因而研究细胞凋亡有重要意义。细胞凋亡检测方法很多,应用流式细胞仪技术可根据细胞在凋亡过程中发生一系列形态、生化变化从多个角度对细胞凋亡进行定性和定量的测定。 二十一. 流式细胞术在血液学中的应用 细胞分选 流式细胞仪能够分选某一亚群细胞,分选纯度>95%。目前细胞分选主要用于研究,临床应用较少。血液学应用最多的是造血干细胞的研究,最近随着造血理论的深入研究关于造血干细胞究竟是否都是CD34+细胞出现一些争论,实验研究证明, CD34-造血干细胞较CD34+造血干细胞更具造血潜能,这些实验研究所用的CD34- 和CD34+细胞就是通过细胞分选获得的。小鼠造血干细胞分选一般按lin-c-Kit+CD34+/ lin-c-Kit+CD34-分选,人造血干细胞分选一般按lin-CD34+/ lin-CD34-分选。为避免某些遗传性血液病如海洋性贫血、异常血红蛋白病的纯合子出生,产前诊断非常重要,这些疾病的主要靶细胞是红细胞,而孕妇血循环中存在着胎儿有核红细胞,只是数量非常少,利用流式细胞仪可从孕妇血液中分选出胎儿有核红细胞(分选条件:CD45-GPA+)进行基因分析,作出产前诊断。 利用流式细胞仪分选免疫担当细胞进行细胞免疫学研究也是目前的热门课题。总之,流式细胞仪能够分选出你想得到的任何一亚群细胞,只要你想得到的某一亚群细胞有合适的单克隆抗体标记,流式细胞仪的分选功能将得到越来越多的科学研究和临床应用。 二十二. 流式细胞术在血液学中的应用 其他 流式细胞仪可能在两方面对骨髓增生异常综合症(MDS)有用,一是测定CD34阳性细胞数,以监测病情,二是测定核蛋白增殖因子(PCNA),有报告PCNA再在生障碍性贫血、骨髓增生异常综合症、白血病三种疾病中表达有明显差异,可辅助鉴别诊断。此外流式细胞仪也可检耐药蛋白,如肺耐药相关蛋白(LRP)、多药耐药蛋白(MRP)、 P170等。 流式细胞仪也可检测细胞因子,细胞内细胞因子如白介素系列(IL-1—IL-14),肿瘤坏死因子(TNF),干扰素(IFN)等,只要用适当的打孔剂即可用抗上述细胞因子单克隆抗体标记后用流式细胞仪测定。 参考文献 1.2.Coulter Corporation: Operater,s Guide (Epics Elite Flow Cytometer),1993, 3.Gray.J.W.Cell cycle analysis using flow cytometry. Int.J.Radiat.Biol.1986;49(2):237. 4.Catovsky.D.et al. A Classification of acute leukemia for 1990s. Ann Hematol1991;62:16. 5.Bemard.A.The limitations in utilizing phenotypic markers to detect minimalresidual diseases i n acute leukemia( 6.Rosenfeld.C.S. Flow cytometric measurement of anti-platelet anibodies. AM.JClin.Pathol.1987;87(4):518. 7.Rothe.G.&Valet.G.Phagocytosis、intracellular PH and cell volume in the multifuctional analysis of granulocytes by flow cytometry. Cytometry 1988; 9:316. 8.Chang L et al.Rapid flow cytometric assay for assessment of natural killer activity. Immun Methods 1993;166:45. 9.Foon.K.A.& Todd.R.F.Immunoligic classification of leukemia and lymphoma. Blood.1986;68(1):1~31. 10.陈璋等.200例急性淋巴细胞白血病免疫学表型特点.中华血液学杂志.1991;12(7):356. 11.C.Darreli Jennings and Kenneth A.Foon:Recent Advance in Flow Cytometry: Application to the Diagnosis of Hematologic Malignancy Blood 1997;90(8):2863-2892. 12.Yoshiaki SONDA,Takafumi KIMURA. Quantitative and qualitative of peripheral blood stem cells. Journal of Clinical and Experimental Medicine, 1996,176:561-565. 13..Chin-Yee I, Anderson L, Keeney M, et al .Quality Assurance of Stem Cell Enumeration by Flow Cytomeyry. Cytometry, 1997,30:296-303. 14.Thomas P.Loughran Jr:CD56+ hematologic malignancies. Leukemia Res. 1999;23(7):675. 15. Takashi Sato,Makio Ogawa:CD34 expression reflects kinetic action of murine hematopooietic stem cells. International J Hematol 1999;69(suppl 1):48。 </st1:chmetcnv%20w:st="> (责任编辑:泉水) |