简介
Wright's染色是一种罗曼诺夫斯基型的变色染色法，通过将经过特殊处理的亚甲蓝染料与伊红在甲醇稀释剂中混合制备而成。该染色法广泛应用于血液学和细胞学领域，用于染色血液涂片和骨髓涂片，以便观察细胞形态和结构。
在Wright's染色中，细胞的碱性成分（如血红蛋白、某些包涵体或颗粒）会与染料中的酸性部分（伊红）结合，呈现出不同深浅的粉红色或红色；而细胞的酸性成分（如核酸、活性细胞质等）则会吸收染料中的碱性部分（亚甲蓝或亚甲紫），呈现蓝色或紫色。染色过程中，pH值的控制至关重要，通常需要将缓冲液的pH值维持在6.4至6.7之间。如果pH值过酸，染色会偏粉红色，核结构染色效果较差；如果pH值过碱，细胞内的结构（如细胞核）会呈现蓝黑色，且结构不清晰。
操作步骤
- 准备染色溶液：将20毫升Giemsa染液与240毫升去离子水混合，需每日新鲜配制。
- 用Beral移液管将适量Wright's染液覆盖在已制备好的血液涂片上，使染液形成约1/8英寸厚的均匀液膜。确保载玻片保持水平，且染液不会流出。
- 静置2分钟后，在载玻片上覆盖等量的Giemsa溶液，并轻轻吹气混合，直至出现金属光泽。静置4分钟。
- 用蒸馏水冲洗载玻片30秒。
- 将载玻片置于室温下自然晾干后进行显微镜观察。
注意事项
染色过酸的原因及修正方法：
- 原因：染色时间不足、缓冲或冲洗时间过长、染液老化。
- 修正方法：延长染色时间、检查染液和缓冲液的pH值、缩短缓冲或冲洗时间。
染色过碱的原因及修正方法：
- 原因：血液涂片过厚、染色时间过长、冲洗不充分、染液成分的pH值偏碱。
- 修正方法：检查pH值、缩短染色时间、延长缓冲时间。