描述
阿拉伯芥细胞悬浮培养是一种重要的植物细胞培养技术，用于研究植物细胞的生长、分化和发育。以下是阿拉伯芥细胞悬浮培养的步骤：
步骤
- 将阿拉伯芥种子浸泡在10%的家用漂白剂中20分钟。
- 用500ml的无菌ddH2O冲洗种子两次，并让它们在层流罩中过夜干燥。
- 将种子通过一个无菌的茶滤器，以分离个别种子。将种子存放在一个无菌的60mm培养皿中，包裹在Parafilm中，直到使用。
- 用一把烧红的铲子将无菌种子放在固体MS0培养基上的55x100mm圆形罐中。将罐子放在荧光灯下，温度约为22°C。
- 当植物足够大时，将它们转移到一个无菌的瓷砖上，切除根部，并将其切成约1mm长的段。
- 继续进行步骤a或b：
a. 将根段放在诱导愈伤组织培养基中的60mm培养皿中，并将培养皿放在荧光灯下，温度约为22°C。
b. 使用最大叶片进行愈伤组织诱导。将每个叶片转移到瓷砖上，并用无菌的刀片损伤叶片，以诱导伤口反应。将叶片放在诱导愈伤组织培养基中的60mm培养皿中，并将培养皿放在荧光灯下，温度约为22°C。 - 在愈伤组织形成后（2-3周），将一个豌豆大小的愈伤组织放在一个100ml无菌的锥形瓶中，加入20ml的液体MSA培养基。
- 用铝箔覆盖瓶子，并将其放在一个恒温环境中，温度约为22°C，振荡器设置为40rpm。7-10天后，可以进行子培养。
- 为了子培养细胞，倒出所有的液体，并加入50ml新的MSA培养基。将整个培养物倒入一个250ml的瓶子中。
- 当组织体积增加一倍时，将30%的培养物转移到一个新的瓶子中。在随后的子培养中，使用100ml的培养基每250ml的瓶子。
- 每周进行子培养，即使组织似乎生长得更慢。根据生长率调整用于接种新瓶子的组织量。
配方
10%（v/v）家用漂白剂
愈伤组织诱导培养基：Gamborg's B5基质培养基，0.5g/liter MES，pH 5.7，0.05mg/liter Kinetin，0.5mg/liter 2,4-二氯苯氧乙酸（2,4-D），0.8%（w/v）琼脂，2%（w/v）葡萄糖
液体MSA培养基：Murashige和Skoog基质培养基，3%（w/v）蔗糖，pH 5.7，0.05mg/liter Kinetin，0.5mg/liter 2,4-二氯苯氧乙酸（2,4-D）
固体MS0培养基：Murashige和Skoog基质培养基，3%（w/v）蔗糖，pH 5.8，0.8%（w/v）琼脂
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