描述

G1/S相阻塞是细胞同步技术中的一种方法，用于同步细胞的生长周期。

实验步骤

1. 通过低血清培养基预同步细胞到G0阶段。将低血清培养基添加到70%汇合的细胞中，并让细胞在此培养基中生长2天。（见提示#1）

2. 通过替换低血清培养基为含有4 μg/ml阿菲地林的完整培养基，刺激细胞重新进入细胞周期，让细胞在此培养基中生长14小时。

3. 或者，将阿菲地林添加到指数生长的细胞中，浓度为4 μg/ml，培养24小时。

4. 去除含有阿菲地林的培养基，并用10 ml PBS冲洗细胞培养。然后用不含阿菲地林的完整培养基替换PBS。细胞现在应该同步到细胞周期中，可以通过丙啶碘染色和流式细胞术轻松检查。

配方

低血清培养基：20 mM HEPES，0.5%（v/v）小牛血清，100单位/ml青霉素，100 μg/ml链霉素，DMEM

PBS：pH 7.2，2.7 mM KCl，4.3 mM二氢钠磷酸盐，1.8 mM单氢钾磷酸盐，137 mM NaCl

完整培养基：100单位/ml青霉素，DMEM，100 μg/ml链霉素，10%（v/v）小牛血清

小提示

1. 阿菲地林的量（和暴露时间）可能根据您使用的细胞线不同而有所不同。另外，不同的细胞线使用不同的培养基，因此“完整培养基”可能与此处描述的不同。