贝氏柯克斯体（Q热立克次体）是引发人畜共患病Q热的重要病原体。由于Q热临床表现复杂，常被误诊为伤寒、上呼吸道感染、肺炎或肝炎，因此建立简便、实用的诊断和流行病学调查方法对于Q热的防治具有重要意义。本研究采用免疫金法（DIGFA）检测Q热立克次体，初步证明该方法快速且实用，现将结果报告如下。
一、材料与方法
1. Q热立克次体及对照菌株：包括七医株（Ⅰ相和Ⅱ相）、李株（Ⅰ相）、YS-8株（Ⅰ相）、Henzerling株（Ⅰ相）、九里株（Ⅱ相）及普氏立克次体，均为实验室保存。嗜肺军团菌LP6、LP8抗原由大坪医院检验科提供，绿脓假单胞菌PN103株、大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌由本室保存。
2. 鼠抗Q热立克次体Ⅰ相单抗杂交瘤1B1D4D8（Ⅰ相ELISA效价＞1∶12 800，Ⅱ相效价＜1∶3 200）由本室自制。按文献[2]方法标记为10 nm胶体金探针。
3. 用兔抗Q热立克次体免疫血清包被硝酸纤维素膜（NC膜孔径0.45 μm），参照文献[2]方法建立DIGFA检测法。
4. 用DIGFA检测实验感染豚鼠血、小鼠肝脾及蜱标本中的Q热立克次体。豚鼠感染后6、11、16、30天采血分离白细胞16份；小鼠肝、脾标本40份，采自20只昆明鼠受染后2、4、6、8、10、12、14、20、30天，称量后研磨成5%悬液，离心取上清液待检；感染Q热立克次体的非洲钝缘蜱血淋巴和成蜱及其卵、下代幼虫悬液标本共8份。
二、结果
1. 探针特异性试验结果见下表：
| Q热立克次体菌株 | 结果 | 对照菌株 | 结果 |
| 七医株颗粒性抗原 | ++++ | 普氏立克次体 | - |
| 七医株超声粉碎抗原 | ++++ | 绿脓假单胞菌PN103 | - |
| 九里株 | ++++ | 嗜肺军团菌Lp6 | - |
| 李株 | +++ | 嗜肺军团菌Lp8 | - |
| Henzerling株 | ++ | 大肠埃希菌 | - |
| Ys-8株 | +++ | 金黄色葡萄球菌 | - |
| 七医株Ⅱ相 | +/- | 阴性对照 | - |
注：以Q热立克次体七医株检测结果为++++，阴性对照为-度量各菌株试验结果。
2. 敏感性试验：取不同稀释度的纯净颗粒性七医株Ⅰ相抗原各50 μl点于同一NC膜上，制成13个斑点。用胶体金探针检测，经3次重复，均只有前4个斑点为阳性，即10-3，相当于50 ng的Q热立克次体抗原。
3. 实验感染标本检测：豚鼠感染后不同时间采血，用DIGFA检测。小鼠感染后2天即可检测到肝、脾中立克次体抗原，6天阳性最强，8天减弱，12天后为阴性，与常规姬姆萨染色结果吻合。对照小鼠标本均为阴性。受染蜱血淋巴和成蜱悬液为阳性，而其卵、下代幼虫及正常蜱标本均为阴性。
三、讨论
PCR和核酸探针检测立克次体具有较高特异性和敏感性[3]，但推广受限。本研究采用DIGFA可批量检测标本，且直接检测颗粒性Q热立克次体抗原（文献多为检测抗体，如登革热病毒抗体[4]、流行性出血热病毒抗体[5]），具有良好特异性。敏感性试验显示，该法至少可检出50 ng的Q热立克次体抗原。
DIGFA检测豚鼠血液中Q热立克次体的方法有望进一步应用于Q热病人的快速诊断。用DIGFA检测受染小鼠脾脏的结果与常规姬姆萨染色一致，故可望应用于Q热自然疫源地调查中野外啮齿动物脏器的检查。
参考文献
1 俞树荣.编著.Q热的病原与防治.北京：科学技术文献出版社, 1990.42-45.
2 Hayat MA. Collidal gold-principales, methods and applications. San Diego: Acad Press, 1989, 23-39.
3 余全，俞树荣.用DNA探针技术检出Q热立克次体.中华微生物学和免疫学杂志，1994，14：349-351.
4 姚海军. 斑点免疫金渗滤法检测血清中抗登革热病毒IgM抗体的研究. 陕西医学检验, 1997, 12: 18-19.
5 赵中夫, 郭进军, 阎小君. 滴金免疫法快速检测肾综合征出血热血清特异性IgM的研究. 中华医学检验杂志, 1998, 21: 96-98.