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福建省转基因水稻快速检测技术研究取得重要进展

2011-01-07 00:00 福建省农业科学院 福建省科技厅 阅读 0
核心摘要: 福建省农业科学院生物技术研究所承担的转基因水稻快速检测技术研究项目通过验收。项目制备了多种蛋白抗体,优化了胶体金试纸条工艺,检测灵敏度与特异性高,为转基因水稻选育提供了快速检测工具。

由福建省农业科学院生物技术研究所承担的省科技计划项目“转基因水稻的快速检测技术研究”已通过省科技厅组织的专家验收。该项目针对转基因水稻的快速检测需求,系统开展了抗体与试纸条技术研究,取得了重要成果。

项目选取了BT类抗虫基因cry1Accry1Cacry30FAa1,以及豇豆胰蛋白酶抑制剂基因cpti与潮霉素磷酸转移酶标记基因hpt,构建细菌表达载体并纯化目的蛋白,成功制备了Cry1Ac、Cry1Ca、Hpt、CPTI蛋白的多克隆抗体,以及Cry1Ab、Cry1Ac、Hpt蛋白的单克隆抗体。

研究建立了胶体金标记检测试纸条技术体系,对试纸条制备中的关键参数如胶体金颗粒大小、标记蛋白最适用量与pH值、膜材选择、试纸条规格、包被液与重悬液组分等进行了优化,探索出最佳制备工艺,制备了Cry1Ac、Cry1Ca与CPTI的转基因检测试纸条,并制订了中试生产技术资料与检测说明书。

利用该技术制备的胶体金试纸条检测转cry1Accpti基因水稻植株,与ELISA结果比较显示:Cry1Ac试纸条灵敏度为96.0%,特异性为100%,符合率为96.1%;CPTI试纸条灵敏度为91.8%,特异性为94.8%,符合率为93.0%。该技术为转基因水稻选育过程中的快速检测提供了可靠工具,具有重要的应用价值。

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