中药活性成分结构复杂、类型多样、含量低、不稳定,因此分离纯化较为困难,目前主要依赖于硅胶柱色谱、大孔吸附树脂柱色谱、聚酞胺柱色谱、凝胶柱色谱、高效逆流色谱、制备型高效液相色谱等色谱技术。为了得到纯度高的活性成分,需经多种溶剂萃取和反复柱色谱,不仅溶剂消耗量大、环境污染严重,而且效率和收率也较低。
近年来,一种以与目标分子具有高度识别的分子印迹聚合物(MIPs)为固定相进行的色谱分离技术——分子印迹技术(MIT)在中药活性成分分离纯化中的应用研究广泛展开,涉及黄酮、多元酚、生物碱、甾体、香豆素等多种结构类型的化合物。这些研究均取得了较好的效果,为在生产实践中推广该技术提供了依据。
黄酮:目前所报道的利用MIT分离纯化的黄酮类化合物多以槲皮素为模板、丙烯酞胺为功能单体。例如,北京大学化学与分子工程学院的谢建春等首先将槲皮素MIPs直接用于银杏叶提取物水解液的分离,得到了槲皮素和与其结构相似的山柰酚,其中槲皮素的回收率为89%,从而证明了利用MIPs直接从中药中获得具有相同药效的化合物的可能性。
多元酚:茶多酚中的儿茶素类成分结构相似,尤其是表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)和其对映体没食子儿茶素没食子酸酯(GCG),常规方法难以分离。中南大学化学化工学院的雷启福等尝试以EGCG为模板,以α-甲基丙烯酸为功能单体,以乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂制备了MIPs,从茶多酚中分离富集EGCG获得了满意效果。
生物碱:MIT在生物碱中的应用较多,特别是手性异构体的分离与测定。例如,Dong等以中药麻黄中的成分(-)-ehedrine为模板,以甲基丙烯酸为功能单体,合成了(-)-ehedrine分子印迹聚合物,该聚合物对(-)-ehedrine有良好的选择性和亲和力。
尽管MIT具有上述种种局限性,还有待进一步深入研究,但由于其具备很高的选择性以及优良的理化特性,必然会随着技术本身的不断发展和应用的逐渐增多,而在中药活性成分分离纯化领域发挥越来越大的作用。