肌组织细胞培养是研究肌肉发育、疾病机制及再生医学的重要基础技术。本文详细介绍骨骼肌细胞和心肌细胞的培养方法，涵盖取材、消化、接种及分化促进等关键步骤。

1）骨骼肌细胞培养

1. 无菌操作下处死动物，取大腿肌组织，剪成0.3～0.5 cm³小块。

2. 用不含Ca²⁺、Mg²⁺的Hanks液配制0.25%胰蛋白酶，于37℃消化组织块30分钟，期间轻摇。消化后经无菌纱网过滤，收集细胞悬液。使用合成培养基（如DMEM）添加10%小牛血清进行培养。为促进肌细胞分化，可补充1%鸡胚提取物。

3. 细胞以2×10⁶/皿密度接种于胶原或明胶包被的培养皿中。明胶包被简便：用Hanks液配制0.01%明胶溶液，覆盖皿底后吸弃，晾干即可。胶原包被可选用鼠尾胶原，能显著增强肌管形成效率。

2）心肌细胞培养

1. 选取新鲜受精鸡卵，于38℃、湿度60%的孵育箱中孵化，每日翻转180°。孵化9～12天后，取出鸡胚。

2. 参照《组织培养和分子细胞学技术》第53页方法获取鸡胚。无菌操作下，用眼科剪打开胸腔，剥离心脏，置于含Hanks液的培养皿中漂洗1～2次。

3. 小心剪除大动脉和静脉，保留心室肌。可采用组织块贴壁法或消化培养法：组织块法将心室剪成1 mm³小块，贴于培养瓶底，加入培养基；消化法用0.1%胰蛋白酶消化后分离细胞。

4. 心肌细胞培养常用M199培养基添加10%胎牛血清，并加入0.1 mM 5-溴脱氧尿苷抑制成纤维细胞增殖。培养48小时后可见自主节律性搏动。