几种常用转化细胞和转化技术是细胞生物学和分子生物学研究中的核心工具，广泛应用于基因功能研究、药物筛选和疾病模型构建。本文详细介绍了三种经典的细胞转化方法：致癌化学物转化、病毒转化和癌基因转化，并提供了具体的实验步骤和注意事项。

1）致癌化学物转化细胞：转化叙利亚地鼠胚胎细胞实验

叙利亚地鼠胚胎（SHE）细胞转化实验是检测化学物致癌性的经典方法。步骤如下：

取材：妊娠第13天取同窝胚胎，去除头和内脏，无菌剪碎至米粒大小。用0.25%胰蛋白酶（含0.01% EDTA）在37℃消化30分钟，过滤、低速离心，弃消化液，加入营养液制备细胞悬液。接种于75 cm²培养瓶，密度10～20×10⁶细胞/瓶，37℃培养2～3天至长满。

贮存：选生长良好的细胞冻存备用。

致癌物处理：解冻细胞，接种于25 ml培养瓶（10万～30万细胞/瓶）。待细胞进入指数生长期，加入致癌剂MNNG（1～3 μg/ml营养液），37℃培养12～48小时。

低血清培养：弃MNNG液，用温PBS洗1～3次，加入含20%小牛血清的培养液继续培养2～3周，然后改用5%血清培养液。低血清抑制正常细胞生长，但转化细胞仍能增殖形成转化灶。

转化灶形成和分离：成功时，处理10天后可见转化灶，可分离培养。

2）病毒转化细胞

EB病毒（EBV）转化B淋巴细胞是建立永生化细胞系的常用方法。步骤如下：

血液制备：用柠檬酸或肝素抗凝取血1～2 ml，分装0.5 ml/管，4℃放置30分钟。

EBV病毒转化：从液氮取出冻存全血，37℃迅速解冻。将解冻细胞与10 ml无血清RPMI 1640混合，2500 rpm离心2分钟，弃上清。用含20%胎牛血清、青霉素、链霉素和庆大霉素的RPMI 1640重悬细胞。

感染：加入0.3～0.5 ml EBV病毒液，37℃水浴30分钟～2小时，不时摇动防凝块。

培养：分装至50 ml培养瓶，补加培养液，置5% CO₂、100%湿度温箱培养。一周后补加2 ml培养基。每3～4天加液或换液，细胞增多时分瓶培养。

3）癌基因转化细胞：基因组DNA转染法

通过磷酸钙共沉淀法将含癌基因的基因组DNA导入受体细胞，实现转化。步骤如下：

提取基因DNA：提取含癌基因的供体DNA。

DNA准备：取50～100 μg DNA，加3M NaCl或醋酸钠至终浓度0.3M，混匀。加2倍体积无水乙醇，3000 rpm离心10分钟，弃上清。

沉淀溶解：加入转染缓冲液溶解DNA，再加入2.5M CaCl₂至终浓度125 mM，轻吹三次。室温放置10～30分钟，待液体微浊蓝色，即可转染。

细胞准备：取生长状态良好、半汇合的指数期细胞，转染前24小时换液。

转染：每瓶加DNA-磷酸钙沉淀0.5～1 ml，37℃作用4～6小时。

培养：弃液，用15%甘油处理3分钟，无血清培养液漂洗1次，加新培养液，37℃培养24小时。

传代：按1:5或1:10分瓶，每2～3天换液，接近汇合时血清降至5%，培养2～3周。

检测：逐日观察，出现转化灶后分离培养。

这些技术为细胞转化研究提供了可靠手段，但需注意实验条件的优化和安全性。