②稳定转化：在非选择性培养基中培养18～24h，使所转移基因得到表达之后，用胰蛋白酶消化细胞，种入适当的选择性培养基中。这种培养基在2～3周内每2～4d须更换1次，以便除***细胞残骸并使抗性细胞集落得以生长。

　　可以克隆单个细胞集落，增殖后进行测定。可以用冰预冷的甲醇将仍保留在培养皿内的细胞固定15min，再于室温用10%Giemsa染色15min，最后用自来水冲洗，这样即可得到细胞集落数的永久记录。Giemsa染液可用PBS或水现用现配，并用Whatman 1号滤纸过滤。

　　重新接种细胞以便取得分隔良好的细胞集落所要求稀释倍数，主要由稳定转化的效率来决定。这一效率可以相差若干个数量级，它起决于：a.受体细胞的型别（即使同一细胞系，克隆不同或传代数不同，也表现出显著差异）；b.导入基因的特性及其转录调控信号强弱；c.转染中所用供体DNA的量。