世界各国微生物发酵法生产天然香兰素工艺导读(2)

        2.Achterholt,  S.;  Priefert,  H.;etc.  Identification  of  Amycolatopsis  sp.  strain  HR167  genes,  involved  in  the  bioconversion  of  ferulic  acid  to  vanillin.  Applied  Microbiology  and  Biotechnology,  54(6),  799-807  ,2000



        3.哈尔曼及赖默股份有限公司.  经过特异性灭活丁子香酚和阿魏酸分解代谢的基因构建制备取代酚的生产菌株.  CN99812907.0（申请日1999.10.20公开日2001.12.05）

HAARMANN  &  REIMER  GMBH  (DE).  Process  for  the  preparation  of  vanillin  and  microorganisms  suitable  therefore.  US6133003（申请日1996.08.23，授权公开日2000.10.17）



        4.Bonnin,  Estelle;  Lesage-Meessen,etc.  Enhanced  bioconversion  of  vanillic  acid  into  vanillin  by  the  use  of  "natural"  cellobiose.  Journal  of  the  Science  of  Food  and  Agriculture,  79(3),  484-486  (English)  1999



        5.Oddou,  J.;  Stentelaire,  C.;  etc.  Improvement  of  ferulic  acid  bioconversion  into  vanillin  by  use  of  high-density  cultures  of  Pycnoporus  cinnabarinus.  Applied  Microbiology  and  Biotechnology,  53(1),  1-6  ,  1999



        6.Muheim,  A.;  Lerch,  K.  Towards  a  high-yield  bioconversion  of  ferulic  acid  to  vanillin.  Applied  Microbiology  and  Biotechnology,  51(4),  456-461  ,  1999

        《世界各国微生物发酵法生产天然香兰素工艺导读（上）》一文关注了德国、法国、瑞士三个国家在微生物发酵法生产天然香兰素方面的研究进展，本文继续关注中国、日本和美国在该领域的研究。



        （四）中国



        2005年东北农业大学张莉力等人对朱红秘孔菌的生长和香兰素的生成两个阶段分别采用高密度培养基和普通培养基进行培养发酵，并通过对香兰素生成阶段的发酵条件的优化后，可生成0．403g／L的香兰素，相应的摩尔转化率为28．8％。



        2004年陕西科技大学生命科学与工程学院周庆礼等人研究发现，阿魏酸是生产香兰素的较佳底物，添加量可达每升数克。发酵至16h后添加阿魏酸，此时链霉菌L1936对阿魏酸的转化能力最强。此株链霉菌不仅能耐受高浓度的香兰素，而且具有一种与其他菌株完全不同的代谢流。在转化阿魏酸时，当香草酸的积累量达到200mg／L时，就开始积累香兰素作为代谢的主要过量合成产物。流加2次底物阿魏酸使之浓度达13g／L，产物浓度达到7．12g／L。相应的摩尔转化率为69．9％。



        2003年天津科技大学申请的中国专利CN200310123675.7揭示了一种微生物转化法生产香兰素的方法，其特征在于：以谷糠、麦麸、甜菜渣等富含阿魏酸的农副产品为原料，或以天然阿魏酸、姜黄素、(异)丁子香酚、4-  甲基愈创木酚为原料，微生物过量转化生产香兰素，包括发酵工艺以及香兰素的分离提取技术。



        （五）日本



        1992年日本TAKASAGO  PERFUMERY  CO  LTD申请的日本专利JP  5227980以丁子香酚为底物，用假单胞菌(Pseudomonas  spp  TK2102)生产香兰素。香兰素在发酵液中累积可达280  mg／L，其他代谢产物是松柏醇、松柏醛、阿魏酸和香草醇。



        1996年日本Mercian  Corp.申请的日本专利JP  09224653通过紫外照射得到Saccharomyces  cerevisiae酵母突变体，能够高产香兰素。



        （六）美国



        1991年美国GEN  FOODS  INC公司申请的美国专利US  5128253在含有葡萄糖的Mandels培养基中培养恶臭假单胞菌ATCC  55180过夜、收集，于0.2vols.Mandels培养基中再悬浮，Mandels培养基中包含5  mM二硫苏糖醇，于室温下培养。3小时后香兰素的浓度达到31.97mg/L，1296小时后达到210mg/L。 (责任编辑：泉水)

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