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利什曼染色法是一种用于血液细胞和寄生虫检测的实验技术。以下是该技术的详细步骤和配方。

染色步骤

准备细胞离心涂片或样本涂片。将湿涂片喷洒Smear Fix?，静置1-2分钟，用蒸馏水冲洗掉固定剂并沥干。或者，将涂片轻轻放入含有乙酸酒精（3%乙酸，95%甲醇）的染色缸中，固定1分钟，用蒸馏水冲洗掉固定剂并沥干。将涂片放在架子上，覆盖1ml利什曼原液，静置20秒。加入2ml pH6.8缓冲液，轻轻摇动混合，染色7分钟。用蒸馏水快速冲洗，然后用pH6.8缓冲液处理2分钟。用蒸馏水快速冲洗，甩掉多余水分，在50°C热板上干燥，或用无纤维吸水纸小心吸干。透明和封片。

结果

红细胞：红色至黄红色；中性粒细胞：深紫色核，淡粉色细胞质，红紫色小颗粒；嗜酸性粒细胞：蓝色核，淡粉色细胞质，红色至橙红色大颗粒；嗜碱性粒细胞：紫色至深蓝色核，深紫色，几乎黑色大颗粒；淋巴细胞：深紫色至深蓝紫色核，天蓝色细胞质；血小板：紫色至紫色颗粒；寄生虫（利什曼病原体，疟原虫等）：深蓝黑色。

配方

利什曼染色液：0.15%利什曼粉末在100%甲醇中，静置24小时后使用。

磷酸盐缓冲液（Sorensen）：A液：0.2M磷酸二氢钠（分子量156），配制方法：溶解3.12g于100ml蒸馏水中。B液：0.2M磷酸氢二钠（分子量142），配制方法：溶解2.83g于100ml蒸馏水中。pH6.8缓冲液：取25.5ml A液和24.5ml B液，用蒸馏水稀释至100ml。