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吉姆萨染色是一种广泛应用于血液细胞和寄生虫检测的染色技术。本文介绍了吉姆萨染色的详细步骤、配方和技巧。

染色步骤

对于涂片或细胞离心制片：

1. 将制备好的涂片在甲醇中固定3至5分钟。

2. 将1毫升吉姆萨原液与2毫升pH 6.4的缓冲液和47毫升蒸馏水混合，染色40至120分钟。

3. 用蒸馏水快速冲洗，吸干并封片。

对于石蜡切片：

1. 去蜡后，用酒精和水冲洗。

2. 在56°C水浴中，将1毫升吉姆萨原液与45毫升蒸馏水混合，染色20分钟至1小时。

3. 用蒸馏水冲洗。

4. 在1/1500的乙酸中分化约30秒，用蒸馏水冲洗。

5. 吸干，酒精中快速冲洗，清化和封片。

染色结果

细胞核：蓝/紫色

嗜酸性细胞：粉红色/红色

嗜碱性细胞：蓝色

嗜酸性粒细胞：红色/橙色

肥大细胞：紫色（颗粒）

寄生虫：蓝色/深蓝色

配方

吉姆萨染液：将7.36克吉姆萨粉末与500毫升甘油混合，在50°C水浴中加热30分钟，冷却后加入500毫升甲醇，混合并过滤。

磷酸盐缓冲液（Sorensen）：

A液：0.2M磷酸二氢钠（分子量156），3.12克溶于100毫升蒸馏水。

B液：0.2M磷酸氢二钠（分子量142），2.83克溶于100毫升蒸馏水。

对于pH 6.4，取36.7毫升A液和13.3毫升B液，用蒸馏水稀释至100毫升。