DRD2 HincII多态性检测方法
时间:2005-07-18 00:00 来源:未知 作者:未知 点击:次
DRD2 HincII多态性是指位于多巴胺D2受体基因(DRD2)第8外显子下游1.9 kb处的一个HincII限制性内切酶位点多态性。该多态性常用于遗传关联研究,特别是在精神疾病、成瘾行为等神经精神疾病的遗传易感性分析中。 实验步骤 模板:基因组DNA 100-200 ng,反应总体积25 μL。 引物: dNTPs:终浓度各200 μM。 缓冲液:终浓度1.5 mM MgCl2,50 mM KCl,10 mM Tris-HCl pH 8.4。 Taq DNA聚合酶:0.5 U/反应(Perkin-Elmer Amplitaq DNA聚合酶,5 U/μL,货号N808-0145)。 PCR循环条件:94°C预变性5分钟;然后94°C变性30秒,60°C退火30秒,72°C延伸1分钟,共30个循环;最后72°C延伸5分钟。 产物大小:HincII酶切后,190 bp片段被切割为140 bp和50 bp(纯合子存在酶切位点时)。 (责任编辑:泉水) |
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