吉姆萨染色是一种广泛应用于血液细胞和寄生虫检测的染色技术。本文介绍了吉姆萨染色的详细步骤、配方和技巧。
染色步骤
对于涂片或细胞离心制片:
1. 将制备好的涂片在甲醇中固定3至5分钟。
2. 将1毫升吉姆萨原液与2毫升pH 6.4的缓冲液和47毫升蒸馏水混合,染色40至120分钟。
3. 用蒸馏水快速冲洗,吸干并封片。
对于石蜡切片:
1. 去蜡后,用酒精和水冲洗。
2. 在56°C水浴中,将1毫升吉姆萨原液与45毫升蒸馏水混合,染色20分钟至1小时。
3. 用蒸馏水冲洗。
4. 在1/1500的乙酸中分化约30秒,用蒸馏水冲洗。
5. 吸干,酒精中快速冲洗,清化和封片。
染色结果
细胞核:蓝/紫色
嗜酸性细胞:粉红色/红色
嗜碱性细胞:蓝色
嗜酸性粒细胞:红色/橙色
肥大细胞:紫色(颗粒)
寄生虫:蓝色/深蓝色
配方
吉姆萨染液:将7.36克吉姆萨粉末与500毫升甘油混合,在50°C水浴中加热30分钟,冷却后加入500毫升甲醇,混合并过滤。
磷酸盐缓冲液(Sorensen):
A液:0.2M磷酸二氢钠(分子量156),3.12克溶于100毫升蒸馏水。
B液:0.2M磷酸氢二钠(分子量142),2.83克溶于100毫升蒸馏水。
对于pH 6.4,取36.7毫升A液和13.3毫升B液,用蒸馏水稀释至100毫升。