本文介绍了植物种子在实验室条件下的培养方法,包括种子消毒、接种和培养的具体步骤。
种子消毒步骤:
1. 用70%乙醇冲洗30秒。
2. 置于1%漂白剂(次氯酸钠,添加少量Tween-20)中5分钟。
3. 用无菌水洗涤2-4次,每次1分钟。
接种和培养:
1. 将消毒后的种子悬浮在0.1%的无菌琼脂糖中。
2. 在无菌操作台中,将4ml种子悬浮液涂布在含有0.8%琼脂糖和1/2 MS10培养基的培养皿中。
3. 在操作台中静置1-2小时,让琼脂糖凝固。
4. 用3M微孔胶带封住培养皿。
5. 在4°C条件下冷处理4天。
6. 将培养皿置于光照条件下培养。
培养基配方(1/2 MS10):
1. MS Macro I 50.0 ml
2. MS Macro II 50.0 ml
3. Myo 10.0 ml
4. FeNaEDTA 10.0 ml
5. MS Vitamines 1.0 ml
6. MS Micronutrients 0.5 ml
7. 蔗糖 10.0 g
8. 加水至1000.0 ml
用1 M KOH调整pH至5.7,也可使用MES(0.5g/l)以保持更稳定的pH。