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分子生物学 DpERK Whole-Mount Immunohistochemistry

This protocol has been optimized for 6 – 10 dpc embryos. Important points: Embryos should be dissected and quickly transferred to fixative as phosphorylation of MAPK is very labile. Fixation must be enough to preserve the diphosphorylatio...

2006-03-16 12:39:59 488

分子生物学 Whole Mount BrdU Staining

Dissect embryos in cold PBS containing 2 mM EGTA. Day 9 embryos and older should have the brain punctured to allow solutions in and out. Fix embryos in 10-15 ml of fresh, cold 4% paraformaldehyde/2 mM EGTA in PBS for two hours at 4°C with...

2006-03-16 12:38:50 589

分子生物学 Mouse 15K microarray hybridization proto

Mouse 15K microarray hybridization protocol protocol by Dennis Wigle last updated May 2002 (modified from Niki Dobric the OCI array facility) NB: It is very important to order and prepare all reagents, and review recipes before beginning p...

2006-03-16 12:37:39 415

分子生物学 De Robertis' Laboratory protocals

Fertilization of frog eggs Primers for RT-PCR Frog whole mount in situ hybridization Mouse whole mount in situ hybridization Paraplast in situ on sections Cryostat in situ on sections Skeletal staining Alcian blue cartilage staining RT-PCR...

2006-03-16 12:35:36 560

分子生物学 PCR引物设计原则

PCR引物设计的目的是为了找到一对合适的核苷酸片段,使其能有效地扩增模板DNA序列。因此,引物的优劣直接关系到PCR的特异性与成功与否。 要设计引物首先要找到DNA序列的保守区。同时应预测将要扩增的片段单链是否形成二级结构。如这个区域单链能形成二级结构...

2006-03-13 23:04:51 1453

分子生物学 质粒提取的原理

碱裂解法从大肠杆菌制备质粒,是从事分子生物学研究的实验室每天都要用的常规技术。可是我收研究生十几年了,几乎毫无例外的是我那些给人感觉什么都知道的优秀学生却对碱法质粒抽提的原理知之甚少。追其原因,我想大概是因为《分子克...

2006-03-02 22:19:14 3604

分子生物学 454测序新方法结合桑格方法完善测序过程

来自纽约2月13日的消息,美国能源部联合基因组研究所(DepartmentofEnergy'sJointGenomeInstitute,DOEJGI)的研究人员表示认为在微生物基因组测序方面表现出巨大的潜力的454LifeSciences公司的测序仪(见快速基因组测序时代到来)虽然并不能完全取代传统的Sa...

2006-02-19 14:05:39 906

分子生物学 cDNA文库构建策略及其分析研究进展

自20世纪70年代中期首例cDNA克隆问世以来,构建cDNA文库已成为研究功能基因组学的基本手段之一。cDNA便于克隆和大量表达,它不像基因组含有内含子而难于表达,因此可以从cDNA文库中筛选到所需的目的基因,并直接用于该目的基因的表达。通过构建cDNA表达文库...

2006-02-14 09:28:46 1032

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