2016年11月16日，来自国内外20家实验室的负责人联名在《Protein & Cell》期刊上发表学术通讯《Questions about NgAgo》，对河北科技大学副教授韩春雨课题组提出的NgAgo基因编辑技术的可重复性提出正式质疑。这是科学家首次以公开发表通讯文章的形式，直接质疑该实验的重复性，标志着围绕NgAgo技术的争论进入新阶段。
通讯指出，各实验组在不同细胞系和生物（如小鼠、斑马鱼）中严格按照韩春雨描述的实验和检测方法进行重复，均无法检测到NgAgo介导的基因编辑。8个独立实验组使用韩春雨提供的NgAgo表达载体（CMV-NLS-NgAgo-SK），针对原论文图4中的293T细胞相同基因进行诱导突变实验，也未在目标位点检测到突变。此外，外源转入的GFP表达在共转NgAgo和gDNA后虽有下降，但测序未发现任何DNA编辑。韩春雨曾解释重复失败可能源于支原体污染，但通讯认为多个独立实验室的细胞同时被污染不现实，且部分作者已事先检测确认无污染。
通讯还提到，韩春雨原论文描述的实验步骤“似乎不需要任何高超的实验技巧”，但一些实验组派研究人员前往其实验室学习时，未被允许参与哺乳动物细胞基因编辑实验，韩春雨以冰箱故障、细胞污染等理由推脱。通讯呼吁原论文作者提供所有重复实验的必要细节，澄清疑点。
韩春雨回应称，他坚持实验能够重复，并正在通过实验找出重复失败的原因，计划通过学术期刊给予回应。此前，10月10日已有13位国内生物学家实名质疑并呼吁第三方介入调查。此次联署新增了3位海外实验室负责人，包括美国国家人类基因组研究所的Shawn Burgess、约翰·霍普金斯大学的程临钊和加州大学洛杉矶分校的林硕，进一步增强了质疑的权威性。
《自然-生物技术》发言人表示，已收到多篇针对韩春雨论文的评论，经同行评议后可能刊发，若批评足以证明论文基本结论无效，原始论文可能被撤稿。