吖啶橙是一种荧光染料,能够与细菌和其他细胞中的核酸结合,推荐用于直接涂片中微生物的检测。该方法特别适用于快速筛查通常无菌部位(如脑脊液)的样本、血液涂片或含有蛋白质材料的涂片,因为在这些样本中,区分微生物和背景材料可能比较困难。
操作步骤
1. 制备待检测样本的涂片。
2. 自然风干。
3. 用甲醇固定1至2分钟。
4. 将滴管保持直立,轻轻挤压以破碎内部的玻璃安瓿。
5. 用吖啶橙溶液覆盖涂片,染色2分钟。
6. 用自来水彻底冲洗,自然风干。
7. 使用荧光显微镜,在低倍镜和油浸物镜下观察。
结果解释
细菌和真菌会染成鲜亮的橙色,背景呈现黑色至黄绿色,白细胞则会染成黄色、橙色和红色。
质量控制
每次进行测试时,都要用肺炎链球菌(ATCC 6303)的涂片进行染色测试。