苯丙氨酸羟化酶（PAH）基因的MspI多态性是一种遗传变异，位于该基因的第8内含子附近。本文介绍了一种通过PCR扩增和MspI酶切分析来检测该多态性的方法。

实验步骤

模板：基因组DNA，100-200 ng/反应体积25μl

引物1（PAHM）：5'-GAA GCA TAT TGT ATC TGC CC-3'，100 ng/反应

引物2（PAHM2）：5'-CAC ATG TCC CAA CAG CTC AT-3'，100 ng/反应

dNTPs：终浓度200μM

缓冲液：含2.25 mM MgCl₂，50 mM KCl，10 mM Tris-HCl pH 8.4

Taq DNA聚合酶：0.5 U/反应（Perkin-Elmer Amplitaq DNA聚合酶，5 U/μl，货号N808-0145）

PCR循环条件：95℃ 5分钟；95℃ 30秒，58℃ 30秒，72℃ 30秒，共30个循环

产物大小：MspI酶切后，野生型（+/+）产生300 bp和125 bp两个片段，原大小为425 bp。