描述

DRD2 TaqI "D" 多态性是指位于多巴胺受体D2基因（DRD2）上的一个限制性片段长度多态性（RFLP）位点，由限制性内切酶TaqI识别。该多态性位于第2外显子下游约3.5 kb处，与多种神经精神疾病（如精神分裂症、成瘾行为）的遗传关联研究密切相关。

实验步骤

模板：基因组DNA，每25 μl反应体系使用100-200 ng。

引物：

• 引物1（TaqDck4）：5' CCT CTG AGG CTT ACT GTC TG 3'，每反应100 ng。
• 引物2（D2Ex2UP7）：5' AAA ACT AGG GAG GGT CAG AG 3'，每反应100 ng。

dNTPs：终浓度各200 μM。

缓冲液：终浓度1.5 mM MgCl2，50 mM KCl，10 mM Tris-HCl（pH 8.4）。

Taq DNA聚合酶：每25 μl反应体系0.5单位（推荐使用Perkin-Elmer Amplitaq DNA聚合酶，5 U/μl，货号N808-0145）。

PCR循环程序：94°C预变性5分钟；然后94°C变性30秒，60°C退火30秒，72°C延伸1.0分钟，共30个循环；最后72°C延伸5分钟。

注意：这两条引物可识别相距仅160 bp的两个多态性位点；如需区分，可将PCR产物分为两份，分别用两种限制酶进行酶切。

产物大小

TaqI酶切后：300 bp片段被切割为212 bp和88 bp（若存在酶切位点纯合子）。

参考文献

Kidd, K.K., B. Morar, C.M. Castiglione, H. Zhao, A.J. Pakstis, W.C. Speed, B. Bonne-Tamir, R.-B. Lu, D. Goldman, C. Lee, Y.S. Nam, D.K. Grandy, T. Jenkins, and J.R. Kidd, 1998. A global survey of haplotype frequencies and linkage disequilibrium at the DRD2 locus. Human Genetics 103:211-227.