RNA干扰（RNAi）是一种在动植物体内广泛存在的序列特异性转录后基因沉默机制。在哺乳动物细胞中，长度为19～25个核苷酸的双链小干扰RNA（siRNA）能够高效、特异性地抑制靶基因的表达。本研究利用pBS/H1SP载体表达双链RNA转录产物，用于抑制HIV-1特定基因的表达。

为评估由H1启动子转录的siRNA在细胞内的作用效果，我们采用以增强型绿色荧光蛋白（EGFP）为报告基因的pEGFP-C1质粒。通过荧光显微镜观察，可直观检测EGFP在细胞中的表达情况。将HIV-1 siRNA表达载体与表达相应EGFP-HIV融合基因的质粒共转染人胚肾293细胞，结果显示：与对照质粒相比，转染pHIV-siRNA质粒的细胞中EGFP-HIV的表达受到显著抑制。通过这一途径，成功筛选出能有效抑制HIV-1基因表达的siRNA序列。

此外，我们还在同一载体上同时表达两种或三种针对不同HIV基因的siRNA，实现了多重靶向抑制，获得了良好的协同抑制效果。这一策略为开发基于RNAi的HIV-1基因治疗提供了重要实验依据。