siRNA抑制HIV-1基因表达的研究

关键词：siRNA，双链RNA，基因沉默，HIV-1

摘要：

RNA干扰 (RNA interfering，RNAi) 现象是动植物体内的一种序列特异性的、转录后基因沉默的过程. 在哺乳动物细胞中，19～25个核苷酸长短的双链siRNA (small interfering RNA) 可有效地抑制基因表达. 利用pBS/H1SP载体，它表达的双链RNA的转录产物可以用来抑制特异性HIV-1基因的表达. 在siRNA实验中，为了比较由H1启动子转录的siRNA在细胞内的作用，使用以绿色荧光蛋白 (EGFP) 为报告基因的载体——pEGFP-C1质粒，在荧光显微镜下，很容易地看到EGFP在细胞中表达. 将HIV-1 siRNA表达载体与表达相应EGFP-HIV融合基因的质粒，共转染人胚肾293细胞，结果表明，和对照质控载体相比，转染了pHIV-siRNA质粒的细胞中EGFP-HIV的表达得到显著抑制. 通过该途径，筛选出能抑制HIV-1基因表达的有效siRNA. 此外，还在同一载体上表达两种或三种siRNA，分别针对不同的HIV基因，获得了良好的抑制效果。

详见附件1 (责任编辑：泉水)

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